【摘 要】
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目的 探讨NGF对NMDA受体NR1亚单位表达调节的作用机制及其可能的信号通路.方法 以原代培养海马神经元制备缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型,应用FDA-PI荧光
【机 构】
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华中科技大学同济医学院神经生物学系,武汉430030
【出 处】
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中国神经科学学会第四次会员代表大会暨第七届全国学术会议(The 7th Biennial Meeting and the
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目的 探讨NGF对NMDA受体NR1亚单位表达调节的作用机制及其可能的信号通路.方法 以原代培养海马神经元制备缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型,应用FDA-PI荧光标记和RT-RCR方法观察NGF及其信号通路对OGD神经元损伤及NMDA受体NR1亚单位表达的影响；应用电泳迁移率变更分析(EMSA)检测NGF及其信号通路对OGD神经元内神经元限制性沉默因子(neuron-restrictive silencer factor,NRSF)与NR1DNA结合力的影响.结果 与正常对照组比较,2h OGD处理后,神经元死亡率和NR1 mRNA的表达明显上升(P＜0.05).NGF处理后,OGD诱导的神经元死亡率和NR1 mRNA表达明显降低(P＜0.05).在此基础上,给与特异性抑制剂处理,OGD十NGF+U0126组神经元死亡率和NR1 mRNA表达水平,与OGD+NGF组相比无显著差异(P＞0.05).而OGD+NGF+wortmannin组神经元死亡率和NR1 mRNA表达明显增加(P＜0.05).EMSA分析表明NGF能显著增加OGD神经元NR1/NRSE和NRSF的结合能力,且这种作用能被wortmannin所抑制.结论 NGF可以抑制OGD诱导的NMDA受体NR1亚单位的异常表达.NGF的神经保护效应由TrkA-PI3-K通路介导.通过该信号通路可以增强负性转录因子NRSF与NMDA受体NR1亚单位基因的结合能力,从而在转录水平上抑制NR1的表达.
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