【摘 要】
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引言根据GenBank登录的MO HSP70基因序列,设计特异性引物对MO新疆分离株HSP70基因进行扩增,克隆入T载体中测序.将HSP70基因亚克隆入表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T-1-HSP70,并转化入大肠埃希氏菌BL21 (DE3)中,用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物.SDS-PAGE分析证实表达的重组融合蛋白相对
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046
【出 处】
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中国畜牧兽医学会2014年学术年会
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引言根据GenBank登录的MO HSP70基因序列,设计特异性引物对MO新疆分离株HSP70基因进行扩增,克隆入T载体中测序.将HSP70基因亚克隆入表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T-1-HSP70,并转化入大肠埃希氏菌BL21 (DE3)中,用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物.SDS-PAGE分析证实表达的重组融合蛋白相对分子量为53 kD;Western blot分析表明该重组蛋白可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应,证实表达的重组HSP70具有良好的反应原性.重组HSP70蛋白免疫小鼠后可诱导机体产生特异性抗体,证实该重组蛋白具有良好的免疫原性.本研究为绵羊支原体肺炎亚单位疫苗和免疫诊断的研发奠定了前期基础.
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