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研究背景:近年来大量研究报道肠道菌群及其代谢产物参与了免疫系统功能的调控,肠道微生物群不仅参与机体固有免疫的调控,在肠道粘膜体液免疫中也发挥着重要作用。B淋巴细胞为机体内发挥体液免疫作用的主要细胞,其通过B细胞受体(B cell receptor,BCR)来识别特异性抗原从而产生针对相应抗原的抗体。近期研究发现多样性的肠道微生物定植后,机体在建立了共生抗原的耐受后,肠道黏膜部位分泌的免疫球蛋白形成了多元化的蛋白谱。记忆B细胞是机体受抗原刺激后产生,在多样性肠道微生物刺激下,机体记忆B细胞BCR重链CDR3组库的特征构成还未见详细阐述。目的:采用Illumina HTS技术和系统的微生物与免疫生物信息学分析方法,解析小鼠肠道微生物多样性,以及外周(脾脏)、区域(小肠)组织中记忆B细胞BCR-H-CDR3组库的同质性与异质性,初步探讨GF、SPF级3月龄BALB/c小鼠脾脏和小肠记忆B细胞多样性、克隆性、重叠性等组库构成特征。方法:分别选取3月龄的无菌级(germ-free,GF)和无特定病原体级(specific pathogen free,SPF)的雌性同窝BALB/c小鼠各3只共6只(MGF1、MGF2、MGF3、MSPF1、MSPF2、MSPF3),获取6只小鼠的粪便,分别提取粪便DNA,通过Illumina(Hiseq2500/4000)平台对每只小鼠肠道微生物进行测序,解析两种级别小鼠肠道微生物的构成;通过磁珠分选获取6只小鼠的脾脏和小肠的记忆B细胞,提取DNA,送immuneSEQ公司进行基因测序,利用immuneSEQ分析软件等对序列多样性、克隆性、重叠性等组库特征构成进行分析。结果:(1)GF级和SPF级6只小鼠脾脏(SP)和小肠(Ⅰ)组织样本中记忆B细胞CDR3序列总数/独特序列数为:MSPF1Ⅰ:1430/1360;SP:2946/2763;MGF1Ⅰ:146/142;SP:4170/3811MSPF2Ⅰ:2801/2653;SP:2326/2184;MGF2Ⅰ:553/528;SP:294/278;MSPF3Ⅰ:2562/2423;SP:5877/5537;MGF3Ⅰ:81/80;SP:1030/964(2)GF、SPF级小鼠的肠道和脾脏记忆B细胞BCR重链CDR3组库的多样性、克隆性等构成存在一定的差异。