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目的：构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染细胞多肽27(ICP27)真核表达质粒.方法：应用PCR技术从HSV-2333株的基因组中扩增ICP27基因,并连接至真核表达载体pEGFPC2,对阳性克隆进行菌落PCR 、酶切和测序鉴定后,成功构建了重组质粒pEGFPC2-ICP27.用Xfect转染试剂盒将重组质粒pEGFPC2-ICP27转染至Vero细胞中,并用RT-PCR 及western blot检测其表达情况.结果：ICP27基因在Vero细胞中得到正确表达.重组质粒pEGFPC2-ICP27 转染Vero细胞及表达鉴定重组质粒pEGFPC2-ICP27及质粒pEGFPC2转染Vero细胞48h后,于倒置荧光显微镜下观察.转染两种质粒的细胞均有绿色荧光蛋白表达.RT-PCR结果表明只有转染重组质粒pEGFPC2-ICP27的Vero细胞所提取的RNA 才能扩增出ICP27基因,而β-actin(452bp)在转染了两种质粒的Vero细胞所提取的RNA中均可扩增出来.Western blot结果显示,在转染pEGFPC2-ICP27的Vero细胞中能检测到EGFP-ICP27融合蛋白,而在转染空质粒的Vero细胞中未检测到.真核表达质粒pEGFPC2-ICP27的构建成功,为进一步研究ICP27 对宿主细胞的影响奠定了基础.结论：本研究首次成功构建了HSV-2 ICP27真核表达质粒pEGFPC2-ICP27,并转染至Vero细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR及western blot检测其表达,为进一步研究HSV-2 ICP27参与细胞凋亡的机制、探讨其参与细胞发生凋亡的途径、解释ICP27在病毒潜伏与再激活过程中的作用奠定了基础,也可为临床防治生殖器疱疹提供实验依据.