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[目的]采用大孔树脂法分离提取辣蓼黄酮乙酸乙酯部位(FEA)和正丁醇部位(FNB),并采用高效液相色谱法定量分析两种有效部位的黄酮成分;通过体内外试验探讨辣蓼总黄酮的抗炎作用的分子机制。[方法](1)用超声法与酶解法对辣蓼黄酮进行提取并与浸提法、水煎醇沉法、超声法比较总黄酮得率;(2)采用XDA-8大孔树脂法对辣蓼总黄酮的富集,并进行FEA与FNB的动态吸附试验;(3)采用高效液相色谱法对FEA与FNB中芦丁、槲皮素、槲皮苷的含量进行测定;(4)用80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL的FEA或FNB作用于脂多糖(LPS)刺激诱导的RAW264.7细胞炎症体外模型,研究其对该模型下ROS、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8以及IL-10水平的影响,研究辣蓼黄酮的体外抗炎效果;(5)对小鼠腹腔注射LPS建立内毒素血症模型,每日灌服200,100,50 mg/kg的FEA或FNB,连用3天后对内毒素损伤的保护作用,考察辣蓼黄酮的体内抗炎效果;(6)通过FEA与FNB预处理对LPS刺激RAW264.7细胞炎症体外模型中iNOS、COX-2、AMPKα、MAPK家族p44/42、SAPK/JNK、p38及其相应蛋白磷酸化的影响,探讨FEA与FNB抗炎作用的分子机制。[结果](1)超声法配合酶解法提取辣蓼总黄酮的得率最高;(2) FEA中芦丁、槲皮苷与槲皮素的平均含量分别为281.99 mg/g、170.00 mg/g、83.31 mg/g;FNB中芦丁、槲皮苷与槲皮素的平均含量分别为150.33 mg/g、146.73 mg/g、73.82 mg/g;(3) FEA或FNB预处理对LPS刺激下RAW246.7细胞产生ROS、NO和TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8有下调作用;(4) FEA与FNB预处理3天后能降低肠MPO与MDA水平、肺脏中TNF-α、IFN-α、IFN-γ和IL-2水平与血中ACP水平,显著提高肝脏T-SOD水平与GSH-PX水平;(5) FNB或FEA预处理能显著降低LPS诱导的iNOS与COX-2蛋白表达增高(P<0.05),极显著增加了p-AMPKα/AMPKα的比值(P<0.01),极显著抑制p-ERK/ERK水平(P<0.01);FEA预处理RAW264.7细胞能极显著的降低p-P38/P38水平(P <0.01),能极显著的抑制p-JNK/JNK水平(P<0.01)和c-Jun蛋白的表达水平(P<0.01)。[结论](1)辣蓼黄酮经超声酶解法与XDA-8大孔树脂纯化后得到FEA与FNB,经HPLC检测后发现主要成分为芦丁、槲皮苷与槲皮素。FEA与FNB预处理3天能显著降低内毒素血症小鼠的死亡率及内毒素性脏器损伤;(2) FEA与FNB预处理能显著降低LPS诱导的RAW246.7细胞ROS、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8以及IL-10水平,该机制可能是由于FEA与FNB预处理抑制了MAPK信号通路中的ERK、JNK以及c-JUN磷酸化。