聚合酶链反应(PCR)检测鸭瘟病毒弱毒和强毒方法的建立和应用研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cttc_tom
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根据Genbank文献合成了1对用于扩增鸭瘟病毒(Duck Plague Virus,DPV)的引物,其扩增幅度为498bp,以鸭瘟弱毒CHa株DNA为模板,筛选最佳反应条件和试剂工作浓度,建立了检测DPV的PCR方法,该法最低能检测到10fg DPV DNA,能特异地检测DPV弱毒和强毒,而对鸡马立克氏病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸭病毒性肝炎病毒、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、鸭副伤寒沙门氏菌和鸭疫里默氏杆菌呈阴性.雏鸭经皮下接种鸭瘟弱毒DPV-Cha株后4h,即可在心、肝、脾、肾、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑和小脑检出DPV的DNA,24h和120h均能从血、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、小脑、大脑、胸肌、骨髓、粪便、舌头、食道等19种组织器官检出DPV的DNA.成年鸭接种强毒SC1株后2h能从肝、脾、法氏囊、胸腺、大脑检出DPV的DNA,感染24小时和感染死亡鸭能从血、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、口腔分泌物、皮肤、大脑、胸肌、骨髓、粪便、舌头、食道检出DPV的DNA.该法可用于DPV感染的早期诊断、鸭产品的进出口检疫、鸭瘟分子流行病学调查及鸭瘟弱(强)毒在鸭体内的分布研究.
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