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通过对Genbank发布的PPV、PRV和PCV2的核苷酸序列进行比对分析，利用Primer PTemier 5.0软件设计出高溶解温度引物，经过PCR反应条件优化，将传统三温式PCR过程中的退火与延伸并为一步，建立多重二温式PCR方法，对三个阳性克隆质粒的敏感性均达到200拷贝，经临床初步验证可靠性高、稳定性好，有利于三种疫病的实验室快速诊断，也可用此法进行流行病学调查，在保证准确性的基础上大大提高工作效率。