【摘 要】
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目的:构建强力霉素调控的胰岛素基因表达载体,验证其成肌细胞转梁和骨骼肌注射后表达情况,对链脲菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠血糖的治疗作用.方法:构建prTA-tet4-rhINS,导入
【机 构】
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大连医科大学附属第二医院内分泌科,116027
【出 处】
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辽宁省第二届学术年会暨第五届青年学术年会
论文部分内容阅读
目的:构建强力霉素调控的胰岛素基因表达载体,验证其成肌细胞转梁和骨骼肌注射后表达情况,对链脲菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠血糖的治疗作用.方法:构建prTA-tet4-rhINS,导入成肌细胞内或注射至糖尿病小鼠双侧后腿骨骼肌内,研究强力霉素对成肌细胞胰岛素表达及小鼠注射部位肌肉胰岛素基因表达影响,对小鼠末梢血糖和体重的影响.结果:RT-PCR结果显示此质粒能在C2C12细胞内表达,胰岛素产生呈现强力霉素依赖性;接受prTA-tet4-rhINS质粒注射治疗的Balb/C和昆明种糖尿病小鼠的血糖水平均显著降低,且呈现出强力霉素依赖性的血糖变化,血清人胰岛素和C肽水平相应升高,小鼠体重保持恒定,小鼠肌肉出现人胰岛素原mRNA表达.电穿孔能明显增强质粒肌肉注射后的转移功率,小鼠禁食24小时后,血糖水平接近非糖尿病小鼠,且无低血糖出现.结论: 本文构建的强力霉素调控的胰岛素原质粒适用于基于骨骼肌进行的糖尿病胰岛素基因治疗.
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