【摘 要】
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现代社会“慢性疲劳综合征”的亚健康状态蔓延.高F 值低聚肽由于独特的氨基酸组成具有良好抗疲劳,抗氧化等生理功效,引起了国内外研究者的广泛关注.而高F 值低聚肽制备过程中定向酶解控制技术是一个难点.前期研究发现黑曲霉M00988 来源外肽酶可优先作用疏水性或芳香族氨基酸的多肽底物.研究对该酶底物结合口袋上关键结合位点进行探究,构建系列突变酶,随后采用二肽底物N-Cbz-Gly-Phe、三肽底物N-C
【机 构】
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北京工商大学北京市质量与安全重点实验室北京 100048;北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心北京 100048
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现代社会“慢性疲劳综合征”的亚健康状态蔓延.高F 值低聚肽由于独特的氨基酸组成具有良好抗疲劳,抗氧化等生理功效,引起了国内外研究者的广泛关注.而高F 值低聚肽制备过程中定向酶解控制技术是一个难点.前期研究发现黑曲霉M00988 来源外肽酶可优先作用疏水性或芳香族氨基酸的多肽底物.研究对该酶底物结合口袋上关键结合位点进行探究,构建系列突变酶,随后采用二肽底物N-Cbz-Gly-Phe、三肽底物N-Cbz-Gly-Phe-Phe与五肽底物Phe-Gly-Leu-Gly-Phe 对突变酶特异活性进行探究,结果表明：突变酶S135G 对肽底物的活性显著优于S135W；突变酶Y160S 与Y206S 对肽底物的活性显著优于Y160G 与Y206G.酶与底物对接结构研究发现：酶对芳香族氨基酸底物特异性与135 位点氨基酸残基的空间位阻和160,206 位的质子化效应相关.研究以小球藻粉为原料验证突变酶的特异活性,制得低聚肽的F 值高达38.09,相比采用木瓜蛋白酶或者风味蛋白酶处理其F 值提高了近40℅.研究为提升定向酶解效率,简化工艺,降低成本制备高F 值低聚肽的技术应用奠定了理论基础.
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