乳腺癌BA46基因转染树突状细胞诱导特异细胞免疫

来源 :2007亚太国际肿瘤生物学和医学学术会议暨首届解放军总医院肿瘤综合防治高峰论坛及第二届中国中青年肿瘤专家论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a1390749
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目的:探讨以乳腺癌特异抗原BA46基因转染乳腺癌患者树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性。 方法:取健康人外周血,采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基因转移组及对照组,基因转移组感染携带BA46基因的重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo,对照组以293细胞冻融液刺激,两组细胞均采用重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)诱导DC前体细胞成熟。第7天,收集悬浮细胞(DC),显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析DC的表面标志CD80、CD86、CD40的表达情况;另取该DC与T细胞按1:20比例混合,含5%人血清蛋白的AIM-V为培养基,同时加入IL-2与GM-CSF,共育7天,诱导获得细胞毒性T淋巴细(CTL),取BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞,采用51Cr释放法测量杀伤效率,同时以流式细胞仪检测CTL群体中CD8/CD4和CD8/CD56的比值。 结果:BA46基因转导的DC表面标志CD80、CD86、CD40的表达均明显高于对照组DC,所激活的T细胞对BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T有很好的杀伤效果,此杀伤具有抗原特异性和MHC限制性,且该T细胞中CD8/CD4和CD8/CD56的比值均明显高于对照组(裂解物冲击DC所激活的T细胞)。 结论:BA46基因转导成功制备DC,并诱导特异的CTL,为乳腺癌的DC基因转导疗法打下基础。
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