【摘 要】
：
本实验的目的在于优化出东方百合的ISSR-PCR反应体系,为东方百合连锁遗传图谱的构建奠定技术基础.以东方百合法兰西的叶片为实验材料,DAN的提取采用了改良CTAB法,PeR扩增采用Touchdow-PCR程序.对影响ISSR-PCR反应的5个主要因素(模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度)进行优化,建立了稳定的、重复性好的东方百合ISSR-PCR反应体系
【机 构】
：
金陵科技学院园艺学院,南京,210038 南京林业大学风景园林学院,南京,210037
【出 处】
：
2011全国转基因新品种培育及产业化应用交流研讨会
论文部分内容阅读
本实验的目的在于优化出东方百合的ISSR-PCR反应体系,为东方百合连锁遗传图谱的构建奠定技术基础.以东方百合法兰西的叶片为实验材料,DAN的提取采用了改良CTAB法,PeR扩增采用Touchdow-PCR程序.对影响ISSR-PCR反应的5个主要因素(模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度)进行优化,建立了稳定的、重复性好的东方百合ISSR-PCR反应体系.20μL反应体系中,内含20ng模板DNA、2.0mmol/LMg2+、0.3mmol/L dNTPs、0.4μ mol/L引物、0.7UTaqDNA聚合酶.
其他文献
以3个抽薹性不同的茎瘤芥品种JL92、JL154和JL202为实验材料，通过对不同阶段发育过程中的可溶性蛋白含量、蔗糖含量、可溶性糖含量以及POD活性等生理生化指标的测定，并对田间农艺性状进行观察和测定,寻找两者与先期抽薹的相关性。结果表明：在第6～9片真叶期生理生化指标的变化与抽薹密切相关，同时节间距长的材料更容易抽薹。本研究为今后耐抽薹茎瘤芥品种的选育,尤其是早期选育奠定基础。
本试验以10份甘蓝杂交种为试材,在初步分析基因型对小孢子培养的影响基础上，以出胚率相对较高的甘蓝杂交种11-2135为试材,通过分析悬浮小孢子预冷处理、不同外界温度对组培苗生根的影响，优化甘蓝的游离小孢子培养体系.结果表明,不同基因型植株花蕾小孢子出胚率不同;悬浮小孢子预冷处理,甘蓝出胚有相对减弱的趋势;20℃外界温度是甘蓝生根的适宜条件。
甘蓝枯萎病由尖孢镰刀菌粘团转化型引起,严重影响着甘蓝的产量和品质.本研究利用甘蓝高抗亲本和高感亲本杂交获得F1,然后通过F1自交获得包含4000个单株的F2群体,利用F1的花蕾进行游离小孢子培养获得包含160个系的DH群体.利用双亲全基因组重测序数据设计的InDel引物,通过DH群体将基因初步定位于384 kb区间内;然后利用F2群体进一步将基因定位于84 Kb范围内.通过甘蓝基因组注释,发现该范
本文运用高通量测序技术研究了茎瘤芥根肿病发病程度不同的土壤中细菌和真菌分布的差异。结果表明，发病轻土壤的微生物多样性大于发病重土壤。发病轻土壤中酸杆菌门，放线菌门,厚壁菌门,变形菌门，浮霉菌门，螺旋体门，被孢霉属，弹球属数量显著增加。本研究为根肿病的生物防治提供了理论指导意义。
为了研究TuMV与不结球白菜的互作，以TuMV接种的不结球白菜叶片为材料,构建cDNA文库。以TuMV响应基因LRK01为探针,与文库杂交,筛选得到28个阳性克隆,经过测序和同源性比对分析表明,一条编码真核延伸因子Tu(EF-Tu)的基因可能参与了不结球白菜与TuMV的互作。通过酵母双杂交验证了EF-Tu与LRK01互作，实时定量分析显示TuMV侵染抑制该基因的表达。
用SSR和SRAP标记技术对结球甘蓝西园六号进行品种纯度鉴定，从94对SSR引物和109对SRAP引物中分别筛选出4对条带清晰、多态性较高且具有高度区分度的引物。依据8对引物在西园六号及其亲本的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果，构建了清晰的品种指纹图谱。通过对特异片段的序列分析,比较了亲本特异片段的碱基差异并揭示了杂交后代中产生非亲条带的本质。两种分子标记构成的DNA指纹图谱，为西园六号品种纯度快速鉴定
以同源四倍体青花菜为试材,进行了游离小孢子培养的胚胎诱导条件及胚胎发育途径的研究.结果表明:基因型是影响四倍体青花菜小孢子胚芽诱导率的重要因子,基因型A36的出胚率最高,达到28.5个蕾-1；热激胁迫(32.5℃)诱导小孢子从配子体发育途径向胚胎发生途径转换，其小孢子胚胎发育途径为典型的单核期小孢子经对称分裂产生胚胎的途径(B途径)；4℃低温预处理1d或2d结合32.5℃热激ld后，对称分裂和多细
利用SRK基因激酶区的2对特异性引物,对18份青花菜自交不亲和DH系进行PCR扩增，经过克隆测序、Blast分析初步鉴定青花菜自交不亲和DH系的S单元型。结果表明：供试18份材料中有15份DH系是Ⅱ型S单元型,另外3份是Ⅰ型S单元型；15份Ⅱ型DH系的SRK片段序列完全同源；3个Ⅰ型DH系的SRK片段序列不完全同源；即18份青花菜DH系中有4种S单元型。
本研究以近年来报道的新型叶用芥菜细胞质雄性不育系0912A为主要研究对象,通过顶交法配制杂交组合,选育获得1个叶用芥菜强优势组合(0912A×X3),在已经明确超亲优势和超中优势的基础上,进一步研究叶用芥菜雄性不育杂交组合(0912A×X3)的超标优势.结果表明:杂交组合(0912A×X3)主要农艺性状单株重的超标优势为51.11％;杂交组合(0912A×X3)在蛋白质和可溶性固形物鲜样营养品质上
本文通过耐抽薹萝卜品种筛选及不同栽培方式试验,提出了耐抽薹萝卜高产栽培技术.即:选用雪单1号萝卜,1月底至2月初播种,每667m2种植6000株,每667m2施纯氮20 Kg,磷肥50Kg,氮磷肥全部作底肥,高垄点播,地膜覆盖栽培,4月底5月初收获,每667m2产量可达4000 Kg.