【摘 要】
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目的：预测、筛选鹦鹉热嗜衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白基因，并研究其在感染了Cps的Hela细胞中的表达时相情况。方法：通过生物信息学分析结合相关文献报道，预测Cps T3SS效应蛋白编码基因，原核表达纯化GST-预测基因融合蛋白，并免疫BALB/c小鼠，制备多克隆抗体，采用间接免疫荧光检测预测蛋白在感染细胞的定位情况。分别在Cps感染Hela细胞后2h,8h,24h,36h,48h后提取蛋白，以制备
【机 构】
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南华大学病原生物学研究所,衡阳 421001
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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目的：预测、筛选鹦鹉热嗜衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白基因，并研究其在感染了Cps的Hela细胞中的表达时相情况。方法：通过生物信息学分析结合相关文献报道，预测Cps T3SS效应蛋白编码基因，原核表达纯化GST-预测基因融合蛋白，并免疫BALB/c小鼠，制备多克隆抗体，采用间接免疫荧光检测预测蛋白在感染细胞的定位情况。分别在Cps感染Hela细胞后2h,8h,24h,36h,48h后提取蛋白，以制备的多克隆抗体为一抗通过Western Blot来观察蛋白表达时相。结果：预测了6个CpsT3SS效应蛋白编码基因构建的重组质粒经测序鉴定证实插入片段为目的基因，测序结果与Genbank上登录序列完全一致；间接免疫荧光检测预测蛋白均定位在包涵体内。结论：Cps0139,Cps0271,Cps0363,Cps0700,Cps0788,Cps0959均为包涵体蛋白，分别在Cps复制周期中检测到该蛋白的表达。
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