【摘 要】
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目的:DT079为重组单克隆抗体类生物类似药,我们在重复给药毒性试验中考察了其与参照药免疫原性的相似性。方法:根据受试物免疫原性风险控制级别和免疫原性对比研究需要,我们
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目的:DT079为重组单克隆抗体类生物类似药,我们在重复给药毒性试验中考察了其与参照药免疫原性的相似性。方法:根据受试物免疫原性风险控制级别和免疫原性对比研究需要,我们采用本中心制备的抗DT079食蟹猴阳性抗血清,比较了3种不同的ELISA方法用于对比研究的可行性。(1)桥式ELISA方法1:用供试品包被酶联反应板,加入阳性对照品孵育后,加入生物素标记的DT079,用Hrp标记-Streptavidin进行检测,通过TMB显色程度指示样品中ADA含量;(2)桥式ELISA方法2:采用Streptavidin包被的酶标板,加入生物素标记的DT079孵育后依次加入阳性对照及地高辛标记的DT079,用Hrp标记-地高辛行检测,通过TMB显色程度指示样品中ADA含量;(3)间接ELISA方法:在酶标板上包被特异性抗原(药物),加入阳性对照品与包被的抗原相结合,然后加入鼠抗猴IgG二抗(不与人IgG交叉反应),与抗药抗体结合,洗板后,加入HRP标记的羊抗鼠IgG的酶标三抗温育,最后加入TMB显色液显色。结果:方法一及方法二具有可行性,而方法三由于本底值比较高,需要做进一步条件摸索。
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