半滑舌鳎分子标记辅助性别控制技术的建立与应用

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半滑舌鳎是分布在我国黄渤海的重要海水经济鱼类,半滑舌鳎雌性个体生长比雄性个体快3-4倍;培育半滑舌鳎全雌苗种对于提高半滑舌鳎的养殖产量和经济效益具有重要意义和推广前景。分子标记技术是进行鱼类性别控制和单性苗种生产的重要途径。笔者筛选到半滑舌鳎雌性特异AFLP标记,并建立了半滑舌鳎遗传性别鉴定的PCR技术(ChenSLetal.,2007)。本文,开展了半滑舌鳎人工性逆转的研究,研究了雄激素和高温对半滑舌鳎性腺分化的影响,筛选到能诱导半滑舌鳎雌鱼转化为雄鱼的雄激素种类、浓度以及有效温度。研究表明,在孵化后25-100d对半滑舌鳎进行不同温度或雄激素甲基睾酮(MT)浸浴处理,表明28℃和32℃水温能诱导部分雌鱼向雄鱼转变,将雄性个体的比例从50%提高到66.7和69.2%。当甲基睾酮(MT)浓度为20μg/L·H2O、30μg/L·H2O、80μg/L·H2O、100μg/L·H2O时,在所有MT处理组都能显著提高群体中的雄性比例,分别达到100%、97.7%、97.4%、100%。当性转换的鱼苗生长至50克以上时,对其进行荧光标记,并采样进行DNA分析,采用遗传性别鉴定技术检测性逆转的个体。从中筛选出遗传上雌性、生理上雄性的伪雄鱼。从长至成鱼的300多条性反转舌鳎中,筛选到60多条伪雄鱼。这些伪雄鱼经过近2年的培育后,其中部分伪雄鱼达性成熟。采集部分伪雄鱼的精液与正常雌鱼的卵子进行授精,获得了子一代鱼苗。采集部分伪雄鱼的后代,经过遗传性别鉴定,表明这些鱼苗中具有雌性特异标记的雌性个体比例为73%以上,而普通鱼苗中雌性个体的比率不到50%。本项研究首次建立了半滑舌鳎分子标记辅助性别控制技术,将雌性鱼苗的比例提高了23%以上。
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