人RANK cDNA的克隆策略及其腺病毒表达研究

来源 :全国医药生物技术2010年学术研讨会暨全军第十届生物技术学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dzluzd2009
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OPG/RANKL/RANK信号系统是调节破骨细胞分化与功能的一个关键信号转导通路,通过调控三者之间的比例,可介导破骨细胞的分化和功能改变进而达到治疗代谢性骨病的效果,而借助腺病毒表达系统可使外源基因在破骨细胞获得高效表达.由于人RANK cDNA的5-UTR及编码N端23 aa的序列其GC含量大于82%,本研究针对该cDNA5端GC含量高难以进行RT-PCR克隆的特点,采取密码子优化设计、分段克隆及重叠延伸方法,获得全长ORF,为经济有效获得此类局部高GC含量的基因提供参考策略.
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