【摘 要】
：
目的副结核病(Paratuberculosis),又名约内氏病(Johnes disease),是由副结核分枝杆菌(Mycobacterium paratuberculosis)引起的一种全球性的以反刍动物为主的慢性、消耗性传染病。该病是世界性流行的主要疾病之一,给养牛业和乳制品行业造成重大的经济损失,被国际兽疫局(OIE)列为B类传染病。有报道指出,人的克隆氏病(Crohn s)可能与该病原菌有
【机 构】
：
吉林农业大学动物科技学院 长春130118 吉林农业大学生命科学学院 长春130118
【出 处】
：
泛环渤海地区(七省二市)生物化学与分子生物学会2010年学术交流会
论文部分内容阅读
目的副结核病(Paratuberculosis),又名约内氏病(Johnes disease),是由副结核分枝杆菌(Mycobacterium paratuberculosis)引起的一种全球性的以反刍动物为主的慢性、消耗性传染病。该病是世界性流行的主要疾病之一,给养牛业和乳制品行业造成重大的经济损失,被国际兽疫局(OIE)列为B类传染病。有报道指出,人的克隆氏病(Crohn s)可能与该病原菌有关。目前,该病尚缺乏安全、高效的预防疫苗,以及敏感、特异、快速、简便的诊断方法和诊断制剂。因此,开发副结核病新型诊断试剂及疫苗具有重要意义。方法以副结核分枝杆菌C-2染色体DNA为模板,以34kDa蛋白基因特异性引物P1：5-AAAGGATCCACCATGACCTACTCTCCCGGC-3,P2：5-ATTGAATTCTTAGGCGGGCGTCGGC-3进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳切胶回收纯化后,克隆至pGEM-T Vector中,经内切酶酶切分析及序列分析鉴定重组质粒。
其他文献
研究化学致癌物2,4-二硝基苯磺酸损伤人角质形成细胞HaCaT的蛋白靶标.采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白,通过二维荧光差异胶内凝胶电泳(2D DIGE)研究角质形成细胞HaCaT受2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激前后蛋白表达谱的变化；采用蛋白质荧光染料DeepPurple对DIGE凝胶进行后染色(post-stain)迸一步提高蛋白质斑点定位准确性；使用DeCyder定量分析软件,
采用高通量胶内差异双向电泳技术(2D DIGE)研究角质形成细胞HaCaT受中波紫外线(UVB)处理前后其蛋白质表达谱的变化；通过高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术(HPLC-nESI-MS/MS)鉴定差异表达蛋白,筛选UVB影响皮肤细胞正常生理功能的靶标蛋白.采用UVB(21±1 mj/cm2)照射HaCaT细胞18h,再在正常细胞培养条件下孵育6h,然后抽提蛋白质；采用Cy2、Cy3和Cy5荧光
SUMO(small ubiquitin-related modifier),即小泛素相关修饰物,与泛素蛋白的结构以及与底物的结合过程很相似,需要三种酶的参与,分别为激活酶、结合酶以及连接酶,而且位于C-端的双甘氨酸基序也参与了结合的过程,同时它们的结合过程在特异性蛋白酶的作用下都是可逆的.SUMO激活酶是一个包括SAE1和SAE2的异源二聚体(在酵母中为AOS1和Uba2组成的异源二聚体).SU
成纤维细胞生长因子-8(fibroblast growth factor 8,FGF8)是成纤维细胞生长因子(FGFs)家族的成员之一.FGF8也被称为雄激素诱导的生长因子(androgen-induced growth factor,AIFGF) FGF8在原肠胚时期与早期分化中起着重要作用.并与FGF8在中枢神经系统、颅面器官、心脏系统、四肢及泌尿生殖器官的形成有着重要的关系,是胚胎发育中不可
拟除虫菊酯是根据天然除虫菊的化学结构而仿制成的一类超高效杀虫剂，根据其结构中是否含有氰基，分为Ⅰ型拟除虫菊酯和Ⅱ型拟除虫菊酯两种，是目前使用面积最广，用量大的农用及卫生杀虫剂，占杀虫剂总量20％，占整个杀虫剂使用面积的25％。随着拟除虫菊酯类杀虫剂的使用量和品种不断增加，这类农药的残留问题已经引起人们的广泛关注。对农药残留的传统分析方法样品前处理复杂、仪器昂贵、操作技术要求高，对于中国农产品安全监
角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)又名成纤维细胞生长因子-7(fibroblast growth factor-7,FGF-7),是成纤维细胞生长因子FGFs家族成员之一,KGF可由间叶来源的细胞产生分泌,作用于上皮来源的细胞,KGF具有广泛的生物学活性,可促进上皮细胞的增殖与分化,是迄今发现对皮肤角质形成细胞最有效的促细胞分裂因子。获得KGF的传统方
根据人参对皮肤有增强血液循环、改善皮肤营养环境等美容功效和KGF-2促进上皮细胞损伤修复的作用,本实验选用人参发状根作为生物反应器生产KGF-2蛋白,以期利用人参的抗衰老和抗氧化功能与KGF-2蛋白的促进上皮细胞损伤修复等特点改善皮肤环境,起到祛疤美容的功效,开发传统中药材人参与角质细胞生长因子结合的美容产品.为了提高外源基因在植物中的表达量,本实验将人源KGF-2基因进行了植物偏好密码子的改造,
随着国家“十一五”计划利用植物生物反应器——油体表达系统生产药用蛋白的不断研究,利用油体及油体蛋白Oleosin生产外源蛋白极具开发潜力.目前,许多植物的Oleosin 基因序列与氨基酸序列均已被研究,但有关红花Oleosin基因序列和氨基酸序列均未见报道.因此,探索红花油体以及油体蛋白Oleosin的分离纯化工艺,为利用红花油体系统开发生物反应器产品具有重要意义.本研究以红花脱壳后的种子作为实验
目的：构建高效表达Klotho外膜蛋白的基因工程菌,为其机制研究奠定了基础.方法：通过PCR方法,分别以pET3c-Klotho及Sumo-EGF为模板合成Klotho外膜蛋白及sumo 基因片段,构建四种原核表达载体pET22b-Klotho、pET22b-sumo-Klotho、pET3c-Klotho、pET3c-sumo-Klotho分别转化原核表达宿主菌Rosetta(DE3) plys
舌鳞状细胞癌是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一，它生长快、浸润强、早期常有淋巴结的转移，治疗效果不够理想。放、化疗由于缺乏肿瘤的特异性及产生严重的副作用，极大地限制了药物治疗剂量，使患者体内残留具有潜在增殖力的肿瘤细胞，因而易于复发及发生淋巴结的转移，因此进一步探索新的舌癌治疗途径，探索更有效的治疗药物就显得十分重要，在临床前期的试验中Nutlin-3被证明是有潜在临床应用价值的新的抗癌药物。根据N