【摘 要】
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目的：本研究使用瞬时转染和双荧光素酶报告基因检测系统等分子生物学实验手段检测舒肝凉血汤是否含有雌激素活性，为确保临床上复方使用的安全性提供实验依据。方法：选用雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞MCF-7进行细胞培养。(1)使用MTT法进行复方对细胞活性影响的检测，浓度选用1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml、32 mg/ml。(2)使用转染试剂Lipofectamine
【机 构】
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北京大学基础医学院中西医结合教研室，100083 北京大学临床肿瘤学院中西医结合科，100036
【出 处】
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第十一届全国中西医结合肿瘤学术大会暨国际中医、中西医结合肿瘤学术交流大会
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目的：本研究使用瞬时转染和双荧光素酶报告基因检测系统等分子生物学实验手段检测舒肝凉血汤是否含有雌激素活性，为确保临床上复方使用的安全性提供实验依据。
方法：选用雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞MCF-7进行细胞培养。
(1)使用MTT法进行复方对细胞活性影响的检测，浓度选用1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml、32 mg/ml。
(2)使用转染试剂Lipofectamine 2000共同转染带有雌激素反应元件(ERE)的质粒pERE-TK-Luc和内参质粒pRL；两种质粒可以分别表达萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
药物分组：阴性对照组、阳性对照组(E2)、复方组。复方选用不同浓度；分别在加药后24小时、48小时使用双荧光素酶报告基因(DLR)检测试剂盒，在化学发光测读仪LMaxⅡ上进行检测；对各组两种荧光素酶所产生荧光活性比值(RLU)，使用SPSS13.0的One-wayANOVA方法进行统计学分析。
结果：
(1)MTT:不同浓度的复方对MCF-7有生长抑制作用，并有剂量依赖性。
(2)双荧光素酶报告基因系统检测：雌二醇组与阴性对照组比较有显著性差异(p＜0.05)；复方组与阴性对照组比较无显著性差异(p＞0.05)；复方组与阳性对照组有明显差异(p＜0.05)；复方不同浓度组间统计学无差异(p＞0.05)。
结论：通过体外实验证明复方对MCF-7有抑制生长的作用；复方不具有雌激素活性，为临床用药的安全性提供了实验依据。
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