【摘 要】
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目的：探讨右美托咪定预处理对体外循环大鼠海马组织中TLR4蛋白表达的影响及其可能的分子机制.方法：雄性SD大Sham,重量350～400g按CPB字表法分Sham,每组16只,再根据各组设定时CPB1h每个时间和4只.假手术组(Sham组)：麻醉状态下,透光法大鼠气管插管,右颈内静脉、右股静脉、左股动脉及尾动脉穿刺置管,监测动脉血压,不进行体外循环.体外循环组(CPB组)：同Sham组气管插管及动
【出 处】
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中国医师协会麻醉学医师分会2016年中青年论坛
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目的：探讨右美托咪定预处理对体外循环大鼠海马组织中TLR4蛋白表达的影响及其可能的分子机制.方法：雄性SD大Sham,重量350～400g按CPB字表法分Sham,每组16只,再根据各组设定时CPB1h每个时间和4只.假手术组(Sham组)：麻醉状态下,透光法大鼠气管插管,右颈内静脉、右股静脉、左股动脉及尾动脉穿刺置管,监测动脉血压,不进行体外循环.体外循环组(CPB组)：同Sham组气管插管及动静脉置管后,行CPB1 h.单纯右美托咪定预处理组(Dex组)：大鼠腹腔注射右美托咪定50μg/kg,气管插管及动静脉穿刺置管同Sham组.右美托咪定+CPB组(DC组)：大鼠腹腔注射右美托咪定50μg/kg,气管插管及动静脉穿刺置管同Sham组,行CPB1h.每组设定4个时间点：T1(转流前)、T2(转流1h即转流结束即刻)、T3(停转流后2小时)、T4(停转流后6小时).在各时间点处死大鼠之前,静脉采血,离心后回收血清,保存于-80℃冰箱中,用于ELISA酶联免疫吸附法检测S100-β、IL-6及TNF-α浓度.腹腔注射过量水合氯醛至大鼠死亡,开胸经左心室冰盐水灌注,待流出液清凉后断头取脑,分离海马组织,部分保存于甲醛固定液中用于TUNEL法检测海马区神经元细胞凋亡情况和免疫组化法检测TLR4蛋白.另一部分保存于-80℃冰箱中,用于Western blot法检测TLR4、NF-KB蛋白表达.结果：1.TUNEL法测定海马处神经元凋亡情况同Sham组相比,CPB组和DC组IA值升高(p<0.05),证明存在明显的细胞凋亡；DC组IA值低于CPB组(p<0.05),证明右美托咪定可以显著减少海马区神经元凋亡；右美托咪定组IA值与Sham组相比无明显差别(p>0.05).2.ELISA酶联免疫吸附法检测S100-β、IL-6、TNF-α浓度与Sham组比较,CPB组和DC组T2-T4时刻血清中S100-β、IL-6和TNF-α浓度都升高(p<0.05),Dex组S100-β、IL-6和TNF-α浓度无明显变化(p>0.05)；对比CPB组,DC组T2-T4时刻血清中S100-β、IL-6和TNF-α浓度均降低(p<0.05)；在CPB及DC组中,各组内与T1时刻相比,T2-T4时刻血清中S100-β、IL-6和TNF-α浓度都升高(p<0.05).3.Dex对CPB后海马区TLR4和NF-K B蛋白表达影响与Sham组相比,CPB组和DC组在T4时间点时TLR4和NF-KB蛋白表达增加(p<0.05),同一时刻Dex组TLR4和NF-KB蛋白表达减少(p<0.05)；对比CPB组,DC组T4时TLR4和NF-K B蛋白表达减少(p<0.05),提示右美托咪定能够减少TLR4及NF-KB蛋白表达.结论：右美托咪定通过抑制TLR4信号转导通路,减少NF-KB蛋白表达,降低其下游IL-6、TNF-α水平,从而发挥脑保护作用.
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