土壤中活的但非可培养(VBNC)状态细菌的开发利用研究具有重要的科学与应用价值.研究表明土壤中存在大量未能被培养的微生物资源.本研究利用藤黄微球菌分泌的复苏促进因子(Rpf, resuscitation promoting factor)对VBNC细菌的生长调控作用,从森林、海岛、公园以及沙漠化等生态环境获得VBNC菌种资源,旨在拓展土壤环境中存在对Rpf敏感VBNC菌群存在的认知,解析对Rpf应答种群的组成,期望为探索Rpf对研究获取微生物资源的方法及其应用研究提供科学依据.实验材料与方法：本研究利用藤黄微球菌的信号蛋白分子Rpf,采用最大可能数法(MPN)、平板分离法等对多种土壤VBNC菌群进行复苏培养、分离纯化以及16S rRNA基因序列相似性比较研究.实验结果与讨论：①MPN法能有效判断供试样本中是否存在对Rpf敏感的VBNC优势菌群；②Rpf能使部分供试样本中的VBNC菌群复苏促进生长,提高数十倍可培养物的分离丰度；③16S rRNA基因序列相似性解析结果显示分离到的细菌主要有：高GC革兰氏阳性菌Rhodococcus、Leifsonia、Nocardia、Kitasatospora、Streptomyces、 Microbacterium、Kocuria、Arthrobacter、Cellulomonas、Gordonia,低GC革兰氏阳性菌Bacillus、 Paenibacillus以及革兰氏阴性菌Ensifer、Brevibacterium等属菌种,其中Bacillus属占优势,占分离菌种的25.2％.本研究证实了Rpf能对近缘革兰氏阳性菌-放线菌的VBNC状态细胞具有复苏促进生长的作用；发现对处于VBNC状态的低GC革兰氏阳性菌也具有复苏促进功能,且表明Bacillus属是土壤中易处于VBNC状态的菌群；同时发现Rpf对一些土壤革兰氏阴性菌的生长促进作用,显示Rpf对获得VBNC资源菌群的实际应用价值.本研究揭示了土壤环境中VBNC资源菌群的多样性,能为医学、生物制药、工业、农业、食品安全、环境保护等多领域微生物学的基础与开发应用研究提供新思路,对VBNC状态菌群的形成机理、Rpf同源性复苏活性化作用机制、可培养化VBNC菌群潜在的功能机理尚有待深入地开展研究.