论文部分内容阅读
目的:探索miR-200c在晚期非小细胞肺癌中的表达特点及其在EGFR野生型患者对TKI敏感性中的作用.方法:通过荧光定量PCR确定miR-200c在7种非小细胞肺癌细胞系中的表达量.检索Targetscan数据库明确miR-200c的靶点并用荧光定量PCR和western blot进行验证.构建慢病毒上调A549和H1975中miR-200c的表达,利用miRNA抑制剂下调PC9细胞miR-200c的表达.本研究共收集141例晚期非小细胞肺癌石蜡组织切片标本,用荧光定量PCR检测石蜡组织中的miR-200c的表达情况,并用ARMS法检测标本的EGFR 突变状态.结果:本研究明确了miR-200c的表达与非小细胞肺癌细胞系的上皮表型及对吉非替尼敏感密切相关.在A549和H1975中上调miR-200c的表达可以使E-钙粘素表达升高,ZEB1、pERK、pAKT、波形蛋白表达下降.miR-200c可以增加原发耐药细胞株A549细胞对吉非替尼的敏感性.分析141例非小细胞肺癌患者的石蜡组织标本发现:在总体人群中EGFR野生型患者(n=57)和突变型患者(n=73)二/三线使用TKI的无进展生存期分别为1.8m和12m(P＜0.0001).以miR-200c的2-ΔCt=0.01128(总体人群的中位值)进行分组,miR-200c高表达的EGFR野生型患者使用TKI治疗可以获得较长的无进展生存期(3.95m vs.1.60m,P=0.015).EGFR野生型患者使用TKI治疗的有效率为7％,miR-200c高表达患者的有效率高于miR-200c低表达的患者(12.5％ and 3.0％,P=0.3).通过Cox回归分析,miR-200c可以作为EGFR野生型患者从EGFR-TKI获益的独立预测因子(HR=0.375,95％CI:0.198-0.712,P=0.003).结论:miR-200c在EGFR野生型患者的TKI敏感性中有重要作用.在非小细胞肺癌TKI耐药株中上调miR-200c的表达可以导致间质上皮转化,抑制PI3K/AKT,MEK/ERK信号通路并部分逆转细胞对EGFR-TKI的耐药性.miR-200c可能作为一个预测TKI敏感性的生物标志物来挑选可能从靶向治疗中获益的EGFR野生型患者.