黄瓜花叶病毒诱导的基因沉默载体用于玉米基因功能研究

来源 :中国植物病理学会第十二届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pwd19881217
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  病毒诱导的基因沉默(Virus induced gene silencing,VIGS)广泛用于植物基因功能研究,已有多种病毒/病毒卫星开发为VIGS载体,用于重要作物基因功能研究.目前有报道雀麦花叶病毒(Brome mosaic virus)可用于玉米基因沉默,但仅能用于Va35等少数不常用自交系,且该病毒在玉米上引起的症状严重.我们将自然条件下侵染玉米的黄瓜花叶病毒北京分离物(ZMBJ-CMV)基因组进行改造构建了ZMBJ-CMV VIGS载体,成功沉默了玉米B73中的ZmPDS、ZmIspH、ZmChlI基因,沉默效率达62%以上.ZMBJ-CMV-2bB81::ZmIspH215接种B73后18~60 d,玉米第1~5片真叶中的IspH均可被有效沉默(60%~85%).插入ZMBJ-CMV-2bN81载体的ZmIspH的片段大小为103 bp和215 bp时能引起玉米叶片中IspH的沉默(75%~80%).ZMBJ-CMV-2bN81::ZmIspH215接种24种中外常用玉米自交系后发现其中18种自交系中的IspH可被沉默(42%~92%).本研究成功构建了可有效沉默玉米基因的ZMBJ-CMV VIGS载体,该载体具有病毒症状轻微、沉默持续时间长、可侵染玉米自交系范围广等显著优点.
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