【摘 要】
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为了探明DMSO在绵羊脐带间充质干细胞分化为成肌细胞的作用,本研究将绵羊脐带间充质干细胞用含有DMSO的F12/DMEM合成培养基进行诱导培养后,观察其细胞形态、免疫荧光和流式细
【基金项目】
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中央高校基本科研业务费专项资金资助(C类项目);国家自然科学基金资助项目(31000990)
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为了探明DMSO在绵羊脐带间充质干细胞分化为成肌细胞的作用,本研究将绵羊脐带间充质干细胞用含有DMSO的F12/DMEM合成培养基进行诱导培养后,观察其细胞形态、免疫荧光和流式细胞仪检测成肌细胞特异因子(MyoD、Desmin和MyoG等)表达及Real-Time PCR检测成肌细胞特异因子的相对表达量。其结果显示,与对照组(不含DMSO的F12/DMEM培养基)细胞形态不发生变化相比,用含DMSO的F12/DMEM培养基诱导培养(诱导培养)第21 d后,其细胞由长梭形变化为具有成肌细胞特点的细长管状;在开始诱导培养后的第16 d进行成肌细胞标志性蛋白MyoD、Desmin和MyoG抗体免疫荧光检测结果,与对照组呈现阴性相比,所诱导细胞呈阳性;用流式细胞仪的检测结果,诱导细胞的表达成肌细胞特异因子MyoD、Desmin和MyoG蛋白的阳性细胞率分别为99.3%、99.5%和86.6%;Real-Time PCR的检测结果,与对照组(表达量为1)相比,诱导细胞的MyoD、MyoG和Desmin的相对表达量均升高(分别为3.713+0.01倍、1.861士0.01倍和5.271:±0.01倍)。上述结果表明,DMSO具有诱导绵羊脐带间充质干细胞分化为成肌细胞功效。本研究为探明诱导绵羊脐带间充质干细胞成肌细胞的相关机制提供了依据。
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