为获得更好的检测方法,分别设计了基于葡萄糖传感器结合双功能化纳米磁珠的新型定量免疫层析方法以及结合双功能标记探针的免疫夹心法分别检测大肠埃希氏菌O157:H7以及克罗诺阪崎肠杆菌。免疫层析法采用一步制备的羧基化纳米磁珠,包被蔗糖酶和抗体形成双功能化探针。一部分探针在结果呈阳性时被截留在检测线上,其余部分通过毛细作用移动到被蔗糖处理过的吸收垫,酶促反应产生的葡萄糖可用葡萄糖传感器定量读出,葡萄糖浓度与菌浓度在一定范围内呈线性相关。免疫夹心法将具有水解葡萄糖能力的生物酶分子和抗体同时标记在纳米二氧化硅表面,形成双功能标记探针。以标记有抗体的纳米磁珠作为捕获探针,与样本中的克罗诺阪崎肠杆菌以及双功能标记探针形成夹心结构,催化水解葡萄糖进行定量检测。两种方法的线性范围分别为2.08×10~5～2.08×10~8CFU/mL和9.0×10~2～9.0×10~7CFU/mL,检测限为6.2×10~4CFU/mL和4.2×10~1CFU/mL,且具有良好的特异性和稳定性。实际样品检测的准确率分别为100%和97.5%。说明这两种方法均可用于实际检测,且可作为模式方法,通过更换抗原抗体实现对其他目标物的定量检测,为食品安全分析和临床诊断提供了新的参考。