【摘 要】
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目的:利用荧光差异双向电泳技术(Difference gel electrophoresis,DIGE)来寻找疾病过程中差异表达的蛋白质,为深入研究疾病的发病机制以及防治策略提供了稳定可靠的技术平台
【机 构】
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南方医科大学病理生理学教研室; 广东省蛋白质组学重点实验室;
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目的:利用荧光差异双向电泳技术(Difference gel electrophoresis,DIGE)来寻找疾病过程中差异表达的蛋白质,为深入研究疾病的发病机制以及防治策略提供了稳定可靠的技术平台。方法:用三种不同的荧光染料(Cy2,Cy3,Cy5)分别标记不同的样品,其中Cy2标记内标,Cy3和Cy5分别标记正常对照组和疾病组蛋白样品,标记后淬灭荧光染料,混合一起进行双向电泳,接着利用Typhoon多功能荧光扫描仪扫描后每块胶便可以得到三个胶图,利用Decyder差异分析软件分析差异蛋白质,然后利用Spot picker全自动切胶仪进行挖点,对差异胶点进行胶内酶解后进行质谱分析,得到疾病中差异表达的蛋白质信息。结果:能快速找到疾病过程中的差异蛋白质组,并且具有很好的重复性和可信度。结论:成功建立了DIGE技术平台,为疾病蛋白质组学研究提供可靠的技术支持。
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