【摘 要】
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针对病害频发这一我国渔业健康持续发展所面临的最大问题,本文以斜带石斑鱼为研究对象,进一步探究干扰素γ(IFNγ)在病原识别和递呈过程中的关键作用.IFNγ是主要由NK细胞、CD4+ Thl和CD8+T细胞合成和分泌的具有广谱抗病毒功能和调节免疫系统的Ⅱ型干扰素.相比于哺乳动物中只发现的一种IFNγ基因,斜带石斑鱼中存在两种IFNγ(IFNγ1和IFNγ2).我们对斜带石斑鱼的IFNγ1和IFNγ2
【机 构】
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中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物繁殖重点实验室,广州510275
【出 处】
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第五届“全国石斑鱼类繁育与养殖产业化”论坛
论文部分内容阅读
针对病害频发这一我国渔业健康持续发展所面临的最大问题,本文以斜带石斑鱼为研究对象,进一步探究干扰素γ(IFNγ)在病原识别和递呈过程中的关键作用.IFNγ是主要由NK细胞、CD4+ Thl和CD8+T细胞合成和分泌的具有广谱抗病毒功能和调节免疫系统的Ⅱ型干扰素.相比于哺乳动物中只发现的一种IFNγ基因,斜带石斑鱼中存在两种IFNγ(IFNγ1和IFNγ2).我们对斜带石斑鱼的IFNγ1和IFNγ2进行原核表达和纯化,得到两种IFNγ重组蛋白.为了验证重组蛋白IFNγ的活性,我们进行了呼吸爆发和NO检测实验.呼吸爆发离体实验表明,IFNγ1和IFNγ2均可以促进斜带石斑鱼脾脏细胞系和血淋巴细胞的呼吸爆发.离体实验还表明,IFNγ1和IFNγ2可提高斜带石斑鱼血淋巴细胞NO释放量.为了进一步的功能研究,我们检测了IFNγ在JAK/STAT1通路和TLR通路上相关因子的变化.离体实验表明,在lng/mL和10ng/mL的IFNγ1和IFNγ2分别孵育斜带石斑鱼脾脏细胞系3h后,STAT1及pSTAT1的表达量均出现不同程度的上调.用一定浓度的IFNγ和IFNγ2分别孵育斜带石斑鱼头肾的单核细胞不同时间后,lh,2h和4h的IL-1β均出现不同程度的上调,0.5h,lh和2h的TRAF6也出现了不同程度的上调,同时miR-21-5p,miR-146a-5p和miR-155-3p的表达也出现了不同程度的上调和下调.本研究结果表明,斜带石斑鱼IFNγ与哺乳类IFNγ相似,在免疫系统中起着重要的作用,能够激活相似的下游信号通路诱导免疫相关基因的表达.
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