内质网应激在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用研究

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目的:观察生长停滞及DNA损伤诱导基因153(GADD153)和caspase-12在脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中的动态改变,探讨内质网应激在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:42只大鼠按随机数字表法分为:正常对照组(3只),假手术组(3只),脑缺血再灌注损伤组(36只);脑缺血再灌注损伤组又分为脑缺血2 h再灌注6 h、12 h、24 h、72 h组,每组各9只。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。采用免疫组化染色、免疫荧光双标染色、Western blotting检测脑组织中GADD153和caspase-12的表达。结果:免疫组化和免疫印迹法均显示对照组和假手术组大鼠脑组织中GADD153和caspase-12表达为阴性;再灌注6 h组GADD153表达增加,并逐渐增高,持续至72 h仍明显增高(与再灌注6 h组比较,P<0.05);再灌注6 h组caspase-12表达增加,至24 h达高峰(与再灌注6 h组比较,P<0.01),72 h时仍维持在较高水平。免疫荧光双标染色结果显示,再灌注6 h组可见少量双标阳性细胞数,24 h时双标阳性细胞数均明显增多(与再灌注6 h组比较,P<0.01),至72 h caspase-12单标阳性细胞数减少,GADD153单标阳性细胞数仍较多,双标阳性细胞数减少(与再灌注6 h组比较,P<0.05)。结论:GADD153和caspase-12在脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中的表达随时间呈动态改变,表明内质网应激参与了脑缺血再灌注损伤的病理过程。
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