香蕉枯萎病菌MAPK信号通路与细胞壁完整性相关基因的克隆及功能分析

来源 :中国植物病理学会第十一届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:camino
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  尖孢镰刀菌古巴专化型Fusarium oxysporum f.sp.cubense(FOC)引起的香蕉枯萎病是世界性的香蕉毁灭性病害之一,目前对该病害尚缺乏有效的防治措施.对香蕉枯萎病菌致病相关基因的研究可以帮助了解其致病机理,为该病的防治提供理论依据.丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路在真菌的生长、应激反应、细胞壁完整性和致病性方面起着重要的调控作用.目前,在尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum中与细胞壁完整性相关的MAPK信号通路基因的功能还未有报道.本研究通过基因组Blast分析发现尖孢镰刀菌中存在着与细胞壁完整性相关的三个核心的蛋白激酶元件FoBck1、FoMkk2和FoSlt2,进而设计引物自香蕉枯萎病菌中分别克隆了这三个基因,然后分别进行基因敲除得到目的基因缺失突变体.通过对供试菌株的菌落形态、孢子形态观察及细胞壁合成抑制剂的敏感性测定,结果表明3个突变体菌落形态相似、生长缓慢,但孢子形态与野生型菌株相似;突变体对刚果红(Congo Red)和荧光白(Calcofluor White)的敏感性增加,但在含有十二烷基硫酸钠(SDS)和氯化钠(NaCl)的培养基上生长时,与野生型菌株无显著差异;而在培养基中添加一定量的山梨醇(Sorbitol)可使突变体部分恢复生长;互补转化子则恢复了野生型菌株的表型,初步推断敲除这三个MAPK信号通路的关键基因可能使突变体的细胞壁受损,进而影响其他功能,相关的试验仍在进行之中.
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