论文部分内容阅读
柑橘溃疡病是柑橘上重要细菌病害之一,我国对柑橘溃疡病菌(Xanthomonas axonopodispv.citri)与柑橘互作机理未见系统报道。为构建系统性研究平台,我们以中国柑橘溃疡病菌29-1为出发菌株,利用EZ-Tn5TM<R6Kγori/KAN-2>转座系统,获得约4倍基因组的突变体库,所获得的20 000个突变子在感病葡萄柚Duncan上检测致病性和致病力、在非寄主植物烟草上检测过敏反应的产生以及胞外酶活性测定。共鉴定出38个在柑橘上致病力减弱的突变体、12个柑橘上致病性丧失的突变体、7个烟草上过敏反应减弱的突变体和9个烟草上过敏反应丧失的突变体。结合Southern杂交,明确转座子插入的拷贝数;通过质粒拯救和基因组信息,对转座子插入位点进行确定。38个突变体的插入位点分别位于28个基因内,除了已知的12个基因已有文献报道外,16个基因未见在致病性中起作用的报道。16个基因中参与细菌中心代谢的4个,调控因子3个,运输蛋白1个,伴侣分子1个,核糖体合成1个以及功能未知蛋白6个。这些研究揭示柑橘溃疡病菌的致病性机理以及与柑橘和非寄主番茄的互作机制奠定了材料基础。