基于小分子官能团修饰的PCL对不同类细胞软骨形成的系统评价

来源 :2015年上海市研究生学术论坛(生物化工) | 被引量 : 0次 | 上传用户:laohe5201314
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  关节软骨是减小关节部位所受机械压力的重要组织。但是由于缺乏血管和神经,并且软骨细胞被固定在紧密的软骨组织基质中,受到损伤的软骨组织很难进行自我修复。目前,软骨组织工程的相关研究为构建长期保持功能性稳定的软骨组织带来了希望。成熟分化的软骨细胞和具有多向分化能力的间充质干细胞是软骨组织工程中具有应用潜力的种子细胞。然而,这些细胞在构建理想的软骨组织替代物时对生物材料的要求仍无定论,一方面,软骨细胞需要解决在体外单层培养过程中易发生的"去分化"现象,另一方面,间充质干细胞需定向分化成软骨细胞而不产生肥大化或不稳定的软骨组织。众所周知,生物支架材料不仅为细胞提供了可依附的位点,同时,材料界面的化学性质在调控细胞行为方面也发挥着重要的作用。在本研究中,从兔关节软骨组织分离得到的软骨细胞、经传代多次的软骨细胞以及兔骨髓间充质干细胞被接种于接有不同化学官能团的聚己内酯(PCL)膜表面以评价材料表面化学性质对不同细胞获得软骨表型这一过程的影响。方法:开环聚合法获得一系列接有不同化学基团的PCL (PCL-NH2、PCL-CH3、PCL-COOH、PCL-OH、PCL-C=O)以及未经修饰的PCL通过旋涂的方式制备成膜材料,通过组织学染色、胞外基质定量以及基因表达等方式考察间充质干细胞、软骨细胞以及去分化的传代软骨细胞在该系列材料上软骨形成的情况。结果:接有亲水基团的表面,包括氨基、羧基、羟基和羰基,能够促进兔软骨细胞和兔间充质干细胞的粘附和增殖;在长期的培养过程中,接种于PCL-COOH表面的第一代软骨细胞仍维持圆形并多层聚集生长,同时分泌了最高的GAG含量,而在PCL和PCL-CH3表面则发生了明显的去分化现象;在诱导培养基的作用下,传至三代的软骨细胞仍能够重获软骨表型;亲水性较差的材料,如在PCL和PCL-CH3的表面,兔间充质干细胞在软骨诱导培养基中更倾向于成软骨分化。结论:软骨细胞在体外单层扩增一方面需要基质表面具有适当的细胞粘附力,另一方面要求表面具有与软骨组织的胞外基质相似的酸性化学性质;去分化的软骨细胞以及间充质干细胞进行诱导分化需要亲水性较低的表面,以利于细胞发生聚集。
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