【摘 要】
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鸭疫里默氏杆菌感染是危害养鸭业的最重要的传染病之一.本试验分别应用超声波裂解1型鸭疫里默氏杆菌和甲醛灭活鸭疫里默氏杆菌菌体这两种方法制备抗原包被酶标板,建立了1型鸭疫里默氏杆菌抗体检测的间接ELISA法.其中应用裂解物作为抗原的最适包被浓度是10μg/mL,应用全菌体作为抗原的最适包被浓度是5×108 CFU/mL.用该方法检测雏鸭免疫鸭疫里默氏杆菌蜂胶灭活疫苗后的血清IgG抗体水平的变化,14日
【机 构】
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广东省农业科学院兽医研究所,广州,510640
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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鸭疫里默氏杆菌感染是危害养鸭业的最重要的传染病之一.本试验分别应用超声波裂解1型鸭疫里默氏杆菌和甲醛灭活鸭疫里默氏杆菌菌体这两种方法制备抗原包被酶标板,建立了1型鸭疫里默氏杆菌抗体检测的间接ELISA法.其中应用裂解物作为抗原的最适包被浓度是10μg/mL,应用全菌体作为抗原的最适包被浓度是5×108 CFU/mL.用该方法检测雏鸭免疫鸭疫里默氏杆菌蜂胶灭活疫苗后的血清IgG抗体水平的变化,14日龄抗体水平开始上升,二免10天后达到峰值.
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为了鉴定从狮头鹅心血中分离到的芽胞杆菌,进行了一系列生理生化试验和动物致病性试验.根据试验结果及可鉴定该芽胞杆菌为栗褐芽胞杆菌.同时,提取了该芽胞杆菌的基因组DNA,用细菌16S rRNA基因的通用引物,经PCR方法成功扩增出其部分16S rRNA基因,克隆后测序表明其全长1516 bp,G+C含量为55％.BLAST在线分析显示其与栗褐芽胞杆菌的16S rRNA基因序列一致性＞99.5％,从分子
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采用PCR技术,从大肠杆菌K99中扩增出0.54 kb的K99菌毛抗原基因,然后将其克隆到pUCM-T载体上,并转化至受体菌DH5α中,采用碱性裂解法提取质粒DNA后,用BglⅡ鉴定K99插入的方向并测序.选择目的基因片段插入方向正确的质粒经BamH Ⅰ和SalⅠ双酶切后,通过T4连接酶与同样经BamH Ⅰ和SalⅠ双酶切合成的耐热肠毒素STⅠ核苷酸序列连接,再转化至受体菌DH5α中,通过PCR方
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