斑马鱼模型体内评价富马酸喹硫平和利培酮肝脏毒性

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【目的】评价富马酸喹硫平(Quetiapine fumarate)和利培酮(Risperidone)对斑马鱼诱发的肝脏毒性,以为临床用药安全提供参考。【材料与方法】野生型AB系斑马鱼采用水溶给药,分别给予不同浓度的富马酸喹硫平(4μg/mL、13.3μg/mL、40μg/mL和50μg/mL)和利培酮(10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL和50μg/mL),同时设置空白对照组、溶剂对照组和阳性药物对乙酰氨基酚对照组(400μg/mL、800μg/mL和1600μg/mL),药物处理2天后,每个实验组随机选取10尾斑马鱼,显微镜下观察活体斑马鱼(1)肝脏大小;(2)肝脏变性;(3)卵黄吸收,并拍摄照片,利用图像分析软件进行图像分析,计算斑马鱼肝脏大小变化、肝脏变性程度、卵黄吸收延迟程度。【结果】(1)阳性对照药物对乙酰氨基酚在实验系统中可诱发斑马鱼较严重的肝脏毒性。400μg/mL处理组斑马鱼肝脏未见异常(p≥0.05),提示该浓度不会诱发斑马鱼肝脏毒性;800μg/mL和1600μg/mL处理组斑马鱼出现肝脏面积变小(p<0.01&p<0.001)、肝脏变性(p<0.001)以及卵黄囊吸收延迟(p<0.001)等表型,且均呈现浓度相关性,提示这两个浓度均会诱发斑马鱼肝脏毒性;以上结果提示该项目所用的斑马鱼模型系统可用于药物的斑马鱼肝脏毒性评价。(2)富马酸喹硫平可诱发斑马鱼肝脏毒性,表现为,肝脏变性以及卵黄囊吸收延迟,并均呈现浓度相关性,各处理组斑马鱼肝脏大小均未见异常,与空白对照组比较,没有统计学差异(p≥0.05)。4μg/mL处理组斑马鱼肝脏未见异常(p≥0.05),提示该浓度不会诱发斑马鱼肝脏毒性13.3μg/mL、40μg/mL和50μg/mL处理组斑马鱼均出现不同程度的肝脏变性和卵黄囊吸收延迟,各浓度处理组与空白对照组比较均有统计学差异(p<0.01&p<0.001),提示以上浓度均可诱发斑马鱼肝脏毒性。(3)利培酮可诱发斑马鱼肝脏毒性,表现为,肝脏肿大,肝脏变性以及卵黄囊吸收延迟。利培酮10μg/mL、20μg/mL和30μg/mL处理组斑马鱼均未出现肝脏异常,各指标与空白对照组比较,均没有统计学差异(p≥0.05),提示这些浓度均不会诱发斑马鱼肝脏毒性;40μg/mL和50μg/mL处理组斑马鱼出现肝脏变性和卵黄囊吸收延迟,与空白对照组比较均有统计学差异(p<0.05&p<0.01&p<0.001),50μg/mL处理组斑马鱼同时出现肝脏肿大,与空白对照组比较,统计学差异显著(p<0.05),以上结果提示40μg/mL和50μg/mL的利培酮可诱发斑马鱼肝脏毒性。【结论】富马酸喹硫平和理赔铜均可诱发斑马鱼肝脏毒性,同临床结果报道一致;以上结果说明斑马鱼模型可用于评价药物的肝脏毒性,且将在药物早期肝毒性评价中发挥越来越重要的作用。
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