中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究

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目的:(1)观察中药壁虎对小鼠的急性毒性反应,为拟定小鼠用药剂量提供依据。(2) 探讨中药壁虎抗肿瘤作用及其作用机制。方法:(1)急性毒性试验:最大耐受量(MTD)测定。预试验结果提示该药毒性较低,无法测出半数致死量(LD50),故对受试药物进行其最大耐受量(MTD)测定,以最大浓度最大体积给小鼠灌胃及腹腔注射给药,连续观察小鼠行为活动等指标和毒性反应程度7天。(2)体内抑瘤实验,观察该药在体内对小鼠 S180肉瘤的抑瘤作用。实验用昆明种雌性小鼠(26±2g)60只,无菌条件下取接种第7天的 S180小鼠腹水,用0.9% 生理盐水稀释至含瘤细胞1×106/ml 于每只小鼠右腋下接种0.2ml,次日将小鼠随机分6组,每组10只。第1组为空白对照组,第2组为阳性对照组(环磷酰胺腹腔注射100mg/kg,接种后第一天腹腔注射一次),第3、4、5组为壁虎粉(壁虎干燥全体焙干后研磨成粉,用0.2%羧甲基纤维素配成混悬液)高、中、低剂量组分别为13.5g/kg,9g/kg,4.5g/kg 灌胃1次/日,连续灌胃14天,第6组为低剂量壁虎组合用环磷酰胺腹腔注射(剂量同前),实验期间让动物自由进食和饮水。14 d 后小鼠称重,取眼眶血计数白细胞数,处死取瘤块、胸腺、脾脏称重,分别计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数。并做腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力实验,以求得吞噬百分率及吞噬指数,了解该药对免疫系统影响。结果:(1)急性毒性试验: 两种给药途径观察7天小鼠无中毒表现,均健康存活。(2)一般状况与体重变化:荷瘤鼠各组一周后均逐渐出现毛发稀疏、聚集、不活泼、行动迟缓和进食量减少等现象,以化疗组和空白对照组表现最差。小鼠的体重与接种前比较,化疗组降低,其他各组均增加。(3)抑瘤作用: 各治疗组瘤重均低于对照组,与对照组比较,化疗(CTX)组,高剂量中药组,中剂量中药组, 低剂量中药组,低剂量中药加化疗(CTX)组瘤重均具有显著性差异(P<0.05),抑瘤率分别为:58%、43%、35%、42%、70%。与 CTX 组比,低剂量中药+CTX 组优于 CTX 组(P< 0.05)。实验结果表明中药壁虎对 S180腹水型肉瘤移植瘤有明显抑制作用。低剂量中药组与 CTX 合用有明显增效作用。(4)中药壁虎对白细胞数、免疫器官指数的影响:空白组、化疗 (CTX)组、高剂量中药组、中剂量中药组、低剂量中药组,低剂量中药加化疗(CTX)组白细胞数(1×109)分别为:10.98±3.9020、7.35±2.2207、10.7889±2.1751、9.04±2.2824、11.09±3.5224、 8.89±2.3722;胸腺指数(1×10-3)分别为2.662±0.1313、1.939±0.9801、2.260±0.0925、 2.680±0.0648、2.376±0.0515、2.11±0.0848;脾脏指数(1×10-3)分别为8.143±0.2944、 5.367±0.5702、6.943±0.3065、7.418±0.2098、7.354±0.2368、6.002±0.3875;结果显示化疗(CTX) 组白细胞数、胸腺指数和脾脏指数与空白组比较均下降(P<0.05),而其余4组与空白组比较无明显影响,说明中药壁虎的毒性反应较低。(5)巨噬细胞吞噬红细胞能力:空白组、化疗(CTX) 组、高剂量中药组、中剂量中药组、低剂量中药组,低剂量中药加化疗(CTX)组吞噬率(%) 为33.6±2.15、8.7±1.89、19.3±4.56、20.1±3.45、18.4±2.56、14.3±3.47;吞噬指数0.54±0.534、 0.143±0.323、0.274±0.435、0.323±0.278、0.297±0.332、0.192±0.245;结果显示各用药组与对照组比较吞噬率、吞噬指数均下降(P<0.05),以化疗(CTX)组下降明显。说明中药壁虎没有提高机体免疫力的作用,其抗肿瘤作用机制不是通过提高机体免疫力实现的。结论:(1)中药壁虎未见急性毒性反应,应用安全。(2)中药壁虎对小鼠 S180肉瘤有抑瘤作用。(3)中药壁虎抑瘤同时可改善荷瘤小鼠一般状况,不降低白细胞数及胸腺、脾脏指数,该药毒副作用小。 (4)中药壁虎与环磷酰胺合用有增效作用。(5)中药壁虎抗肿瘤作用机制不是通过提高机体免疫力实现的。
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