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目的：建立一种操作简便、且能够获得数量较多及活力良好的人脐静脉内皮细胞的分离、培养、纯化及鉴定方法.方法：采用0.1％(w/v)Ⅱ型胶原酶灌注消化分离人脐静脉内皮细胞,将其置于含有20％胎牛血清、内皮细胞生长因子及肝素的DMEM培养基内培养,倒置显微镜观察内皮细胞生长情况,免疫组化方法鉴定内皮细胞的Ⅷ因子相关抗原.结果：细胞呈梭形或椭圆形生长,单层铺路石状排列或呈漩涡状排列.免疫组化检测结果显示Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应.结论：0.1％胶原酶Ⅱ消化液灌注是获取人脐静脉内皮细胞的一种可靠方法,细胞纯度高、为进一步研究人体大血管内皮细胞的功能奠定了较好的基础.