双重PCR-DHPLC技术检测水稻细菌性谷枯病菌的研究

来源 :2010年进出境植物检疫学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbdzj
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本研究建立了一种应用双重PCR结合变性高效液相色谱技术(Polymerase chain reaction-denatured high performance liquid chromatography,PCR-DHPLC)检测水稻细菌性谷枯病菌的方法。根据水稻细菌性谷枯病菌ITS和gyrB基因,设计两对特异性PCR检测引物,对水稻细菌性谷枯病菌株和非水稻细菌性谷枯病菌株分别进行PCR-DHPLC及双重PCR-DHPLC特异性检测,并进行了灵敏度及阳性菌株的同源性分析。结果显示,PCR-DHPLC检测的特异性强、灵敏度为菌浓度4×102 cfu/mL,7株水稻细菌性谷枯病菌PCR产物同源性一致。该方法能简便、灵敏、高特异性地对水稻细菌性谷枯病菌进行高通量的自动化检测。
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