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利用RT-PCR技术扩增猪呼吸道冠状病毒(PRCV)AR310毒株的S基因片断，构建了重组腺病毒中间载体pDNR-1r-Sl和表达质粒pInt.AV1.SpaT-S1。采用Cre-L0oxP同源重组腺病毒系统和共转染技术构建了携带PRCV S基因片断的复制缺陷型重组腺病毒，经目的基因PCR检测和序列测定，结果表明：PRCV S基因片断已正确地插入到腺病毒基因组中；Western-blotting和间接免疫荧光实验证明PRCV S基因片断在HEK293细胞中成功地获得了表达；子代重组腺病毒Ad5-PRCV S1的滴度为7x107TCID50/mL。携带PRCV S基因片断重组腺病毒的构建为PRCV和TGEV重组腺病毒新型疫苗的研究奠定了基础。