【摘 要】
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DNA复制过程中,复制不会在冈崎片段合成完毕后释放,此过程需要由解旋酶、聚合酶与DNA相互作用形成的复合体发生解离。冈崎片段合成过程中会形成一个缺口(nick)或者单链DNA区域。本研究以噬菌体T7 DNA复制体为模型,通过表面等离子共振(SPR)和Trap实验,测定带有缺口或者单链区域的DNA链与聚合酶、聚合酶与解旋酶之间的解离常数Kd和解离速率koff,发现聚合酶从DNA区域处解离比聚合酶从解
【出 处】
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2016第九届全国大学生创新创业年会
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DNA复制过程中,复制不会在冈崎片段合成完毕后释放,此过程需要由解旋酶、聚合酶与DNA相互作用形成的复合体发生解离。冈崎片段合成过程中会形成一个缺口(nick)或者单链DNA区域。本研究以噬菌体T7 DNA复制体为模型,通过表面等离子共振(SPR)和Trap实验,测定带有缺口或者单链区域的DNA链与聚合酶、聚合酶与解旋酶之间的解离常数Kd和解离速率koff,发现聚合酶从DNA区域处解离比聚合酶从解旋酶处解离更容易,并且在缺口DNA区域,聚合酶从DNA上解离和解旋酶从聚合酶-DNA复合物上的解离都比从单链DNA区域的解离速度更快,说明复制环的释放可能是通过聚合酶从后滞链DNA处解离而实现的(即支持“碰撞机制”),而聚合酶仍然会保留在复制叉上。
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