【摘 要】
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目的：通过与单纯的神经干细胞移植进行比较,探讨NEP1-40基因修饰的神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠行为学恢复的影响.方法：从孕18天的Wistar大鼠胚胎大脑皮质中分离获得原代
【机 构】
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四川大学华西医院骨科,成都 610041
【出 处】
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海峡两岸骨科专委会学术交流会、抗震救灾五周年学术研讨会暨第十届华西国际骨科论坛
论文部分内容阅读
目的：通过与单纯的神经干细胞移植进行比较,探讨NEP1-40基因修饰的神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠行为学恢复的影响.方法：从孕18天的Wistar大鼠胚胎大脑皮质中分离获得原代神经干细胞,进行体外培养及传代,取传第3代的神经干细胞采用Nestin免疫荧光染色进行鉴定.通过基因钓取方法合成NEP1-40目的基因,采用已体外成功构建的慢病毒载体将NEP1-40基因导入第三代神经干细胞内建立NEP 1-40基因修饰的神经干细胞.将30只成年SD大鼠在胸9水平进行脊髓右侧半切后随机分为3组各10只(SCI组,NSCs组,NEP 1-40-NSCs组),伤后第7天在损伤局部分别植入细胞培养液、神经干细胞及NEP 1-40基因修饰的神经干细胞各5ul.另取10只仅行胸9椎板切除而不损伤脊髓设置为空白对照组.细胞移植前和移植后8周通过BBB测试及网格测试评价各组大鼠神经功能恢复情况.结果：所有脊髓半切大鼠术后即刻BBB评分为0分,术后1周(细胞移植之前)时为0.7±0.65.假手术组大鼠右后肢运动完全正常,BBB评分为21分.所有脊髓半切大鼠术后1周(细胞移植之前)网格试验时平均摔倒次数为15.5±1.96次,假手术组大鼠在通过相同网格时右后肢未见明显摔倒；细胞移植后8周,BBB测试及网格测试结果显示：损伤组大鼠BBB评分最低且网格摔倒次数最多,单纯神经干细胞移植组BBB评分较之有显著增高且网格摔倒次数有显著减少(P＜0.01),而NEP1-40基因修饰的神经干细胞移植组BBB评分最高且网格摔倒次数最少,和前两组相比均有显著差异(P＜0.01).结论：NEP1-40基因修饰能进一步提高单纯神经干细胞移植对于大鼠脊髓损伤后行为功能恢复的治疗效果,为研究神经干细胞移植治疗脊髓损伤提供了新的思路和实验依据.
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