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研究背景:肝纤维化作为一种慢性肝损伤引起的创伤愈合反应,巨噬细胞在其中发挥关键的调控作用。不同来源的巨噬细胞在肝纤维化的进展期作用不同。在组织损伤的起始阶段,肝实质细胞损伤释放DAMPs活化组织定居Kupffer细胞,使之释放IL-1β、TNF-α等促炎细胞因子,进一步加重肝实质细胞损伤,同时募集骨髓来源巨噬细胞进入肝脏。骨髓来源巨噬细胞分泌促炎细胞因子并产生ROS,活化星形细胞,促进细胞外基质沉积,成为进展期纤维化加重的主要因素。Kupffer细胞在损伤起始阶段容易发生凋亡,随后逐渐恢复数量。我们课题组前期研究提示,Notch信号影响巨噬细胞活化而参与肝纤维化调控。因此,不同来源的肝巨噬细胞如何参与肝纤维化的进展过程,其调控的分子机制是什么,都是亟待回答的问题。研究目的 :以Notch信号为切入点,以小鼠肝纤维化为疾病模型,从整体、细胞和分子水平回答不同巨噬细胞亚群在小鼠肝纤维化进展期的作用并阐明其调控的分子机制。方法 :利用巨噬细胞中Notch激活（Lyz-Cre/STOPf-NICD）小鼠分别建立CCl4诱导的肝纤维化模型和BDL肝纤维化模型,通过组织学染色、血清学检测和纤维化相关分子及炎性因子表达检测对肝纤维化程度进行评价,并利用FACS对巨噬细胞亚群表型和功能状态进行细胞学分析。结果 :巨噬细胞激活Notch信号加重肝纤维化进展,细胞外基质沉积增多,肝实质细胞破坏加重,肝星形细胞活化增强,凋亡减少,血清中炎性因子表达上调。巨噬细胞亚群表型分析显示,纤维化进展期,在巨噬细胞中激活Notch信号,肝脏Kupffer样细胞恢复减慢,肝脏炎性骨髓来源巨噬细胞中Ly6Cint促炎巨噬细胞增多,Ly6Clo促修复型巨噬细胞减少。分子机制的初步探讨提示,Notch信号在巨噬细胞中激活,肝脏Kupffer样细胞促炎能力增强,促修复能力减弱;肝脏Kupffer样细胞促星形细胞活化分子表达增强,促星形细胞凋亡分子表达降低;体外研究发现,Notch信号在巨噬细胞激活,骨髓来源巨噬细胞中Ly6Chi巨噬细胞Ly6C表达从高向低转变速度减慢。结论 :纤维化进展期的疾病表型和细胞学表型结果初步提示,在肝纤维化进展期,Notch信号通过调控不同巨噬细胞亚群之间的转变以及不同巨噬细胞亚群的功能而参与肝纤维化的调控。其作用的分子机制有待进一步深入研究。