【摘 要】
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香蕉是重要的粮食和经济作物,广泛种植于热带、亚热带地区,在我国南方各省均有大面积种植。然而由香蕉束顶病毒(Banana bunchy top viruS,BBTV),黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic v
【基金项目】
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农业公益性行业科研专项(nyhyzx07-30);国家香蕉产业技术体系(nycytx-33-06)
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香蕉是重要的粮食和经济作物,广泛种植于热带、亚热带地区,在我国南方各省均有大面积种植。然而由香蕉束顶病毒(Banana bunchy top viruS,BBTV),黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)及香蕉线条病毒(Banana streak viruS,BSV)引致的香蕉病毒病是香蕉生产上的主要限制因子之一。快速稳定的病毒检测技术是控制病害的根本途径。目前常用的有酶联免疫(ELISA)法、PCR及免疫PCR等。针对香蕉病毒而言,目前仅有二重PCR检测BBTV和CMV的报道。本研究根据GenBank中已发表的香蕉束顶病毒(BBTV)、黄瓜花叶病毒(CMV)和香蕉线条病毒(BSV)的基因序列,找出保守序列分别设计出特异引物,在建立各病毒单项PCR技术的基础上,通过优化多重PCR反应条件,从而建立了能同时检测香蕉3种病毒的多重PCR检测体系。该体系可同时扩增BBTV的710 bp,CMV的513 bp和BSV的985 bp的特异片段。这些片段经克隆测序结果表明,多重PCR扩增的不同病毒片段是特异和专化的,其核苷酸序列与相应病毒基因片段的相似性都达95%以上。该体系的灵敏度测定结果表明,从相当于2×10-3mg或以上感病植物组织中均能检测到3种病毒。
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