补肾填精方对顺铂所致POF模型小鼠卵巢细胞FasL和Bcl-2蛋白表达及凋亡率的影响

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目的:通过腹腔注射顺铂建立小鼠卵巢早衰模型,观察中药补肾填精方不同剂量对卵巢早衰模型小鼠卵巢颗粒细胞FasL和Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡率的影响,探讨其治疗效果和作用机制。方法:将135只雌性昆明小鼠随机分为正常对照组(简称正常组)、模型组、强的松组、雌激素组、中药高剂量组(简称高剂量组)、中药中剂量组(简称中剂量组)、中药低剂量组(简称低剂量组),除正常对照组外均采用连续腹腔注射顺铂7天建立卵巢早衰模型并阴道细胞涂片判定小鼠雌激素水平;造模结束后第4天开始灌胃,连续30天,中药高、中、低剂量组分别给予不同浓度的补肾填精方水煎剂灌胃,强的松组、雌激素组分别给予强的松和乙底酚水溶液灌胃,正常对照组和模型组生理盐水灌胃;灌胃结束第2天处死小鼠,流式细胞术检测卵巢细胞凋亡率,免疫组化法检测卵巢颗粒细胞凋亡调控因子Bcl-2和FasL在细胞浆和细胞膜的表达,并进行图像分析。结果:卵巢颗粒细胞胞浆和细胞膜上均可见Bcl-2和FasL表达的棕黄色颗粒。和正常组相比较,造模后各组Bcl-2均表达减弱,而以模型组最明显,几乎不表达;和模型组比较,各治疗组均可见Bcl-2阳性表达,但弱于正常组,差异显著(P<0.01);中药各组和雌激素组比较,中剂量组Bcl-2表达强度无差异(P>0.05),高、低剂量组Bcl-2表达减弱,有显著性差异(P<0.05);中药各组和强的松组比较有差异显著,Bcl-2表达弱于强的松组(P·<0.01)。与Bcl-2表达强度结果相反,和正常组比较,模型组和各治疗组FasL均表达增强,模型组呈现极强表达现象,(P<0.01);和模型组比较,各治疗组均可见FasL阳性表达减弱,有极显著差异,(P<0.01);和雌激素组比较,中剂量组无差异(P>0.05),中药吝组之间比较,以中剂量组FasL表达最弱(P<0.01)。与正常组比较,模型动物均出现卵巢细胞凋亡率上升,有显著性差异(P<0.01);和模型组比较,各治疗组卵巢细胞凋亡率下降,以中剂量组、雌激素组、强的松组最为明显(P<O.05);中剂量组和雌激素组以及强的松组比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:补肾填精方水煎剂可使POF小鼠使Bcl-2在卵泡颗粒细胞膜表达增强,FasL表达减弱,减少卵巢细胞凋亡率,从免疫途径增强其抗病能力和卵巢自我修复能力。
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