【摘 要】
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以珍稀濒危植物细果秤锤树为试材,为探讨其ISSR遗传多样性实验中的不同因素对实验及结果的影响,对PCR反应体系中的5个潜在因素(Mg2+,dNTP,引物,raq酶和DNA模板)分别在不同水平面上进行了对比优化实验,同时进一步优化ISSR反应程序中的退火温度和循环次数.结果表明,20p体系中含约50ngDNA模板、1U Taq酶(takara)、2.5mmol·L-1Mg2+、0.25mmol·L-
【机 构】
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浙江农林大学暨阳学院,诸暨311800;江西农业大学园林与艺术学院,南昌330045 浙江农林大学
【出 处】
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2017全国植物与健康峰会暨中国植物园2017年年会
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以珍稀濒危植物细果秤锤树为试材,为探讨其ISSR遗传多样性实验中的不同因素对实验及结果的影响,对PCR反应体系中的5个潜在因素(Mg2+,dNTP,引物,raq酶和DNA模板)分别在不同水平面上进行了对比优化实验,同时进一步优化ISSR反应程序中的退火温度和循环次数.结果表明,20p体系中含约50ngDNA模板、1U Taq酶(takara)、2.5mmol·L-1Mg2+、0.25mmol·L-1dNTP、0.5μmol·L-1引物,扩增条件为:94℃预变性5min,然后进入下列循环;94℃变性30s到55℃复性30s到72℃延伸90s,共计40个循环;最后72℃延伸5min,降温到4℃保存,获得了较理想的多态性遗传图谱.本研究为建立珍稀濒危植物细果秤锤树的最佳PCR-ISSR反应体系,从而为该植物进行遗传多样性分析及园林应用与研究奠定了一定基础.
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