【摘 要】
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蛋白 small ubiquitin-related modification(sumoylation),是跨物种普遍存在的一种蛋白翻译后修饰.SUMO 蛋白属于一个小的蛋白修饰家族,泛素类似蛋白(Ubls),其特征是泛
【机 构】
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中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,上海,200032
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蛋白 small ubiquitin-related modification(sumoylation),是跨物种普遍存在的一种蛋白翻译后修饰.SUMO 蛋白属于一个小的蛋白修饰家族,泛素类似蛋白(Ubls),其特征是泛素折叠及蛋白酶解后成熟蛋白的C-端Gly-Gly 基序.拟南芥中共有8 种SUMO 异构体.SUMO 蛋白经蛋白酶活化后,由活化、接合、连接三步反应最终加到底物Lys 残基上.目前已知SUMO 化修饰参与热激、低温、干旱、过氧化氢等多种植物非生物胁迫响应.本文构建了SUMO1 突变体(35S-6His-SUMO1H89R)的转基因株系.被SUMO1H89R 修饰的底物肽段经trypsin 切割后的会留下QTGG 的footprint 作为质谱质荷比迁移标记,由此可用于判断SUMO 化修饰的Lys 位点.利用该株系,在100mM,150mM 浓度NaCl起始培养浓度下发现总体蛋白SUMO1 修饰水平逐渐增加；而在200mM NaCl 起始浓度下过表达株系不能萌发.通过亲和标签富集体内SUMO 化修饰的蛋白,利用LC-MS/MS 质谱技术,比较了在非胁迫和150mM 起始NaCl 胁迫下SUMO化修饰的差异蛋白,结果显示有5 个和7 个潜在蛋白和Lys 位点在两种条件存在修饰差异.
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