乳制品中抗生素残留超标的问题引起了人们的广泛关注,检测抗生素的方法主要有微生物法、酶联免疫法、光度法、电化学法、液相色谱或液相色谱与质谱联用法和毛细管电泳法等.毛细管电泳是生物分子分离和分析的有力工具,具有简单、快速、分离效率高等优点,但是常用的紫外检测器受光程短的限制,检测灵敏度需要提高.本研究采用毛细管电泳结合大体积样品堆积在线富集技术同时分离检测牛奶中三种头孢类抗生素：头孢呋辛、头孢噻吩和头孢克肟。首先，压力注入了大量样品；然后，施加反向电压，移出毛细管中的样品基质，头孢类抗生素在入口端富集；随后，加正向电压以常规毛细管区带电泳方式分离。本文优化并确定了最优分离条件：电泳介质为pH 8.2的40 mM磷酸盐缓冲液（含15％异丙醇v/v），分离电压30 kV，检测波长254 nm，分离温度35℃，反向电压-20 kV，富集时间1.6 min，进样时间270s。在此条件下，三种抗生素的检测限在0.90-1.83 ng/mL之间，相对常规区带毛细管电泳降低了84-118倍，线性范围10-10000 ng/mL，加标回收率在86%-107%范围内。