【摘 要】
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目的:重组表达刚地弓形虫ME49株缓殖子期特异性抗原SRS9基因,初步分析其免疫特性.方法:根据SRS9基因序列设计合成引物,应用PCR技术从弓形虫ME49株基因组DNA中扩增出SRS9基因片段,分别将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)、 pET-22b(+)及pET-28a(+)中,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western
【机 构】
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广东省新发传染病重点实验室,南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系,广州,510515
【出 处】
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中国动物学会原生动物学分会第十七次学术讨论会
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目的:重组表达刚地弓形虫ME49株缓殖子期特异性抗原SRS9基因,初步分析其免疫特性.方法:根据SRS9基因序列设计合成引物,应用PCR技术从弓形虫ME49株基因组DNA中扩增出SRS9基因片段,分别将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)、 pET-22b(+)及pET-28a(+)中,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot分析.
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构建cDNA文库是获得生物某一阶段表达全部基因并进行基因筛选和功能研究的一种现代分子生物学方法,酵母双杂交cDNA文库适用于筛选相互作用蛋白,已在刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)等的研究中有所应用.
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新疆是我国重要的牧业经济区之一,据统计(2011年)新疆绒山羊存栏数为693770头,主要分布在准噶尔盆地、巴音郭楞蒙古自治州、克孜勒苏柯尔克孜木盆地的平原荒漠以及天山、阿尔泰山和喀什地区的荒漠草原及干旱贫脊的山地,是当地牧民的主要经济来源.
依据SSU rRNA系统发生树中贾第虫、毛滴虫等在所有真核生物的基部分枝,以及它们细胞结构上的一些"原始特征",如缺少典型的线粒体、高尔基体、过氧化物酶体,早期学者认为贾第虫等代表了从原核细胞到典型真核细胞的过渡状态,是现存的最原始的真核细胞.
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背景:快速增殖的弓形虫速殖子和慢速增殖的弓形虫缓殖子的基因表达不同.miRNA可能参与调控弓形虫这两个无性生殖阶段之间的相互转化.在此,我们采用高通量深度测序的方法将Prugniaud株弓形虫速殖子和缓殖子中的小RNA进行测序,系统的生物信息学分析结果显示速缓殖子中sRNA表达有差异.
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