青藤碱对肝癌Bel-7402细胞增殖抑制和诱导凋亡的研究

来源 :中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhjzhouji
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  目的 研究不同浓度的青藤碱(SN)对人肝癌Bel-7402细胞的作用,探讨青藤碱体外抑制人肝癌Bel-7402细胞生长及诱导其凋亡的作用机制.方法 (1)采用形态学观察青藤碱处理前后细胞的形态学变化;(2)MTT法检测青藤碱对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用;(3)流式细胞术分析细胞周期分布;(4)Hoechst染色和流式细胞术分析青藤碱对细胞的凋亡作用;(5)Western blot检测药物处理前后细胞中环氧合酶2(COX-2)、Bel-2蛋白的表达情况.结果 以0,0.4,0.8,1.6,3.2,6.4 mmol/L作用于肝癌细胞Bel-7402,MTr检测细胞生长抑制率.在低浓度时,青藤碱能促进肝癌细胞Bel-7402生长,与对照组相比在0.4 mmol/L,0.8 mmol/L浓度下,细胞增长率为16.92%,9.53%;在高浓度时,青藤碱能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞生长,并具有时间浓度依赖性.与对照组相比,在1.6 mmol/L,3.2 mmol/L,6.4 mmol/L的作用浓度下,细胞抑制率分别为12.49%,41.90%,77.62%.1.6 mmol/L的青藤碱作用48 h后,Hoechst染色,荧光镜下观察发现,人肝癌Bel-7402细胞核出现聚缩、片段化,呈现典型的凋亡特征.FCM显示细胞被阻滞于G1/S与G2/M期,并且随药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加.Westem blot检测结果显示青藤碱可以抑制Bel-7402细胞COX-2和Bcl-2的表达,并随作用浓度的增大,二者的表达量均出现降低,且bcl-2表达量减少更为明显.结论 青藤碱通过下调入肝癌Bel-7402细胞中COX-2和Bcl-2的表达水平来抑制细胞生长和诱导凋亡.
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