【摘 要】
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白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)是20 世纪80 年代初发现的,具有多种生物学活性的一种细胞因子.IL-4 主要由Th2 细胞分泌,肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞也具有分泌IL-4 的功能.IL-4 在免疫反应中是一重要的细胞因子,对B 细胞、T 细胞、单核细胞、树突状细胞等免疫细胞均有免疫调节效应,对内皮细胞和成纤维细胞等非免疫细胞也发挥着不同的作用,是Th2 细胞分化
【机 构】
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中国药科大学药学院药物分析系,药物质量与安全预警教育部重点实验室,江苏 南京
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白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)是20 世纪80 年代初发现的,具有多种生物学活性的一种细胞因子.IL-4 主要由Th2 细胞分泌,肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞也具有分泌IL-4 的功能.IL-4 在免疫反应中是一重要的细胞因子,对B 细胞、T 细胞、单核细胞、树突状细胞等免疫细胞均有免疫调节效应,对内皮细胞和成纤维细胞等非免疫细胞也发挥着不同的作用,是Th2 细胞分化的最主要决定因素,对Th2 细胞增值、基因转录、抗凋亡和抗肿瘤方面起着十分重要的作用,是机体体液免疫应答的重要调节因子.日本学者Kubota 等从外周血和胸腺中提取mRNA 反转录成cDNA 后插入pFastBac1,通过昆虫表达系统转入AcNPV 杆状病毒表达,获取成熟的鸡白介素-4(ChIL-4)蛋白分子量大约在12.4 kDa.目前,国内外学者对ChIL-4 的研究越来越多,然而在学术研究和临床疾病分析中主要还是以RT-PCR 技术来检测ChIL-4 的相对含量.由于RT-PCR 需要将RNA 逆转录,并且实时荧光RT-PCR 方法受多个因素影响,在免疫分析受限较多,RT-PCR 操作程序繁琐,因此发展快速灵敏且低成本的可直接检测ChIL-4 的电化学免疫传感器具有实用意义.本文首次通过自行人工研制合成的ChIL-4 的特异性抗体,以PDDA 功能化的石墨烯和纳米金复合材料固定抗体而构建了新型无标记阻抗型电化学免疫传感器,实现快速灵敏地检测ChIL-4.在最佳条件下,阻抗的相对变化值与ChIL-4 浓度的对数成正比,其线性范围为0.50~5.0 ×103ng/mL,相关系数R 为0.9991,检测限为 0.50 ng/mL,比已报道关于ChIL-4 的RT-PCR方法检出限约低1~2 个数量级,具有灵敏度高、线性范围宽、检测迅速,以及稳定性好等诸多优点,该电化学阻抗型免疫传感器用来于鸡白介素-4 的检测,获得满意实验结果.
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