多重PCR对大熊猫和野生动物肠道分离菌氨基糖苷类抗生素耐药基因检测研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong452
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本实验组从四川卧龙和碧峰峡大熊猫保护基地的30只大熊猫和16种野生动物的粪样中分离鉴定出了83株革兰氏阴性肠杆菌.并选用氨基糖苷类药物(链霉素、卡那霉素、庆大霉素和新霉素),用K-B法进行药敏实验.结果表明,这些分离菌对链霉素的耐药率最高(28.91%),其次为卡那霉素和庆大霉素分别为12.05%、7.29%,对新霉素的耐药率最低,只有6.02%.并根据Genbank上发表的氨基糖苷类抗生素的四种主要修饰酶基因(aminoglycosides-modifyingenzymes,AMEs):aphA3、aacC4、aadA、aacC2设计了四对引物,结果分别扩增出了四条与预期大小一致的产物,序列分析表明扩增产物与Genbank中的相应序列有很高的同源性(>97.8%).同时,建立并应用四重PCR方法检测分离的83株细菌中AMEs基因流行分布情况.统计结果表明,在分离菌中aphA3基因的检出率最高(25.3%21/83).其次为aadA基因(9.64%8/83)和aacC2基因(9.64%8/83),aacC4基因的检出率最低(2.41%2/83).
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