溶藻弧菌免疫金标试纸条的研制

来源 :中国水产学会鱼病专业委员会第七次会员代表大会暨学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qianchen912009
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  以溶藻弧菌菌体抗原免疫家兔获得A、B两份高免血清.对制备的A、B血清的IgG采用饱和硫酸铵盐析沉淀法结合蛋白A亲和层析法进行纯化.获得了纯度和活性均较高的IgG.用柠檬酸钠还原氯金酸法制备胶体金.确定胶体金标记提纯A血清IgG最适条件并制备胶体金—抗体结合物.在玻璃纤维膜上喷涂结合物溶液并冷冻干燥.在硝酸纤维素膜上包被B血清IgG和羊抗兔抗体作为检测线和控制线.组装双抗夹心试纸条并对其灵敏度、特异性进行评价.建立的胶体金免疫层析试纸法能在5 min内完成检测.结果显示检测灵敏度为1×106 cfu/ml.特异性实验检测显示与河流弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、拟态弧菌、梅氏弧菌、费氏弧菌、美人鱼弧菌等弧菌无交叉反应.研制出的试纸条能快速、灵敏、特异地检测溶藻弧菌.
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