弓形虫GRA8真核表达质粒的构建与体外表达

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目的:构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA8的真核重组表达质粒。 方法:设计GRA8的特异引物,采用多聚酶链反应(PCR)技术从弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码GRA8的基因片段,经克隆至pMDl8-T载体后,亚克隆至真核表达载体pVAC而构建真核重组表达质粒pVAC—GRA8,转化大肠杆菌DH5但;将构建的真核重组表达质粒pVAC—GRA8转染vero细胞,分析转染vero细胞中cRA8的表达状况。 结果:PcR扩增出GRA8基因的特异片段,所荻克隆的序列正确,并被亚克隆到真核表达载体pVAC,构建了真核重组表达质粒pVAC-GRA8;在vero细胞中获得表迭。 结论:成功构建了GRA8的真核重组表达质粒pVAC-GRA8。
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