新基因发现和黑曲霉表达系统

来源 :第七届中国工业生物技术发展高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suhuisu
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  新型酶制剂开发的二个关键因素是新基因筛选和蛋白质高效,二者缺一不可。我们首先通过筛选已知序列和葡萄穗霉基因组测序,从12株真菌中筛选出26个淀粉酶,其中15个真菌淀粉酶成功表达; 筛选出个7个转移葡萄糖苷酶,其中4个成功表达; 筛选出2个a-葡萄糖苷酶; 其中1个成功表达; 筛选出8个β-葡萄糖苷酶,6个β-木糖苷酶,10个糖苷水解酶61家族和13个木聚糖酶,每种酶类中至少有一个成功表达; 筛选出2个β-半乳糖苷酶,其中一个成功表达; 筛选出3个中性蛋白酶,其中一个成功表达。同时开发出具有产业化前景的林伯氏白色念球菌的蛋白酶K和一个用于洗涤领域的新型碱性脂肪酶。我们还针对真菌淀粉酶热稳定性不高的问题,开发出化学稳定剂,使真菌淀粉酶的热稳定性大幅提高。引进蛋白酶工程”保守性氨基酸位点突变”的方法,完成了真菌淀粉酶的蛋白质定向改造的技术开发。最后针对黑曲霉表达菌株产量还需大幅提高的问题,通过菌种改造(诱变和筛选),使黑曲霉菌株蛋白质表达量提高至少一倍以上。
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